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          死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時間:2023-03-22 11:38:13瀏覽次數(shù):281

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Death Associated Protein Kinase 3 (DAP
          物種 Mus musculus (Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)重組蛋白的相關產(chǎn)品:高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白英文名稱:Recombina High Temperature Requireme Factor A1 (HTRA1)非ATPmei體26S亞基13(PSMD13)重組蛋白英文名稱:Recombina Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 13 (PSMD13)蛋白激meiCι

          詳細介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)重組蛋白

          Recombinant Death Associated Protein Kinase 3 (DAPK3)

          Mus musculus (Mouse,小鼠)

          商品介紹:

          ZIP; ZIPK; Dlk; DAP-like kinase; MYPT1 kinase; Zipper-interacting protein kinase

          酶與激酶

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::n/a

          預測分子量:-

          實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

          片段與標簽:N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點:-

          應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          蛋白表達及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

          2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關產(chǎn)品:

          Recombinant Human UQCRC1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human ETS1宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Pig C3a宿主: E.Coli標簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Pig

          Recombinant Human Galectin宿主: E.Coli標簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

          注意事項:

          1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作                                            

          操作步驟:

          Ⅰ 實體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個

          0.5 mL~1 mL

          5×106個

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

          Sorbitol Dehydrogenase產(chǎn)品名稱: 脫氫mei抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

          UQCRFS1產(chǎn)品名稱: 質(zhì)子梯度調(diào)節(jié)蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          Mannan Binding Lectin產(chǎn)品名稱: 甘露聚糖結(jié)合凝集su抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit

          KCC2產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)細胞鉀氯離子轉(zhuǎn)運蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse

          KRBOX1產(chǎn)品名稱: KRBOX1蛋白抗體交叉反應: Human

          REV3L/Polymerase DNA zeta產(chǎn)品名稱: DNA聚合meiζ抗體交叉反應: Human, Mouse

          phospho-Tau (Thr217)產(chǎn)品名稱: 微管相關蛋白單克隆抗體交叉反應: Human

          MAS1產(chǎn)品名稱: MAS1基因抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, GuineaPig

          Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4)交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

          FBXW5產(chǎn)品名稱: FBXW5蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse   

          死亡關聯(lián)蛋白激酶3(DAPK3)重組蛋白人磷脂suan(PA)ELISA試劑盒PA磷脂suanelisa檢測試劑盒Human Phosphatidic Acid(PA)ELISA Kit

          人磷脂爬行mei5(PLSCR5)ELISA試劑盒PLSCR5磷脂爬行mei5elisa kitHuman Phospholipid Scramblase 5(PLSCR5)ELISA Kit

          人磷脂爬行mei4(PLSCR4)ELISA試劑盒PLSCR4磷脂爬行mei4ELISA試劑盒Human Phospholipid Scramblase 4(PLSCR4)ELISA Kit

          人磷脂爬行mei3(PLSCR3)ELISA試劑盒PLSCR3磷脂爬行mei3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Phospholipid Scramblase 3(PLSCR3)ELISA Kit

          人磷脂爬行mei2(PLSCR2)ELISA試劑盒PLSCR2磷脂爬行mei2elisa檢測試劑盒Human Phospholipid Scramblase 2(PLSCR2)ELISA Kit 


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