皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：ELAVL4蛋白抗體Anti-eIF2 alpha/FITC 熒光素標(biāo)記真核啟動因子2α抗體IgG
表皮生長因子樣受體1Anti-eIF4E/FITC 熒光素標(biāo)記真核翻譯起始因子4E抗體IgG
磷酸化絲裂原活化蛋白酶1/2抗體Anti-phospho-eIF4E(pSer209)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化eIF-4E（Ser209）抗體IgG
電子

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10078

細(xì)胞生長實驗 ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運輸條件：冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強，殺菌效果好。

Phospho-SHIP2 (Tyr1135)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白酪磷酸酶2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

ART(Artemin)(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

神經(jīng)激肽 B抗體  NKB 0.2ml

SOX2 英文名稱： 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 0.1ml

EPHB3/Eph receptor B3 英文名稱： 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪酸激酶B3抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-p57 Kip2 (Thr310) 磷酸化周期蛋白依賴激酶抑制因子1C抗體 規(guī)格 0.1ml

ART(Artemin)(抗原) Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

G-CSF 大鼠粒細(xì)胞-集落刺激因子Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 ECE2 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Myt1 髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1抗體 規(guī)格 0.2ml

Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit 人球蛋白輕鏈lambda 96T

SOHLH2 英文名稱： 卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白2抗體 0.2ml

CXCR2 英文名稱： 細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 0.1ml

 ECE2 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Goat  Mouse IgM/FITC FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.3ml

FGGY 英文名稱： 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FGGY抗體 0.2ml

CD24抗體  CD24 0.1ml

 Nrf2/FITC 熒光素標(biāo)記核因子2相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PLK1 絲/蘇蛋白激酶Plk1抗體 規(guī)格 0.1ml

 TRF/Gold 金離子標(biāo)記抗轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.5ml(15nm)
皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基尿碘比色法定量檢測試劑盒50次人α1抗胰蛋白酶（α1-AT）ELISA試劑盒,

組織S-腺苷甲硫（SAM或AdoMet）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次人腺苷脫氨酶（ADA）ELISA試劑盒,

血液S-腺苷甲硫（SAM或AdoMet）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次大鼠凝血因子IX（FIX）ELISA試劑盒,

體液S-腺苷甲硫（SAM或AdoMet）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次大鼠絨毛膜促性腺素（CG）ELISA試劑盒,

S腺苷同型半胱（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次植物B12（VB12）ELISA試劑盒,

S腺苷同型半胱（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次白介素9（IL-9）ELISA試劑盒--動物，人

S腺苷同型半胱（SAH或AdoHcy）酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒20次幽門螺旋菌IgG（Hp-IgG）ELISA試劑盒--動物，人

細(xì)胞糖原化學(xué)水解比色法定量檢測試劑盒20次HE 瓊脂（HE）

組織糖原化學(xué)水解比色法定量檢測試劑盒20次G C瓊脂用于淋球菌的分離培養(yǎng)（OXOID方法）

血液糖原化學(xué)水解比色法定量檢測試劑盒20次L-蘇

細(xì)胞糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次L-去甲腎上腺素

組織糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次白屈菜堿  Chelidonine

血液糖原酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次L-甲基多巴

細(xì)胞糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒20次FMOC-L-谷5-叔丁酯

組織糖原硫酸蒽酮比色法定量檢測試劑盒20次ε-聚賴