產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMP |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時間:2023-03-22 20:27:03瀏覽次數(shù):256
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱 | Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMP |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
產(chǎn)品名稱:鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Recombinant Sphingomyelin Phosphodiesterase 4 (SMPD4)
NSMASE3; NET13; Neutral Sphingomyelinase-3
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::分泌 預(yù)測分子量:19.1kDa 實(shí)際分子量:19kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Ala10~His148 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點(diǎn):7.2 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
周期素依賴性激酶9(CDK9)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 9 (CDK9)Homo sapiens (Human,人)
周期素依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase Inhibitor 3 (CDKN3)Homo sapiens (Human,人)
轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白英文名稱:Recombinant Prealbumin (PALB)Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)
轉(zhuǎn)醛縮酶(TALDO1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Transaldolase (TALDO1)Homo sapiens (Human,人)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后
的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
Mafa產(chǎn)品名稱: v-maf 肌腱膜纖維肉基因同源物A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow
CD66c產(chǎn)品名稱: 胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子抗體交叉反應(yīng): Human
MOGT1產(chǎn)品名稱: MOGT1蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit
MPXV A29產(chǎn)品名稱: 猴痘毒A29單克隆抗體標(biāo)記: Unconjugated
Adesine A3 Receptor產(chǎn)品名稱: 苷受體A3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
SPAG11A產(chǎn)品名稱: 相關(guān)抗原11A抗體交叉反應(yīng): Human, Monkey
MYLK3產(chǎn)品名稱: 肌球蛋白輕鏈激mei3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
RANK產(chǎn)品名稱: 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體/核因子kB受體活化因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rabbit, Sheep
KIR2DS3產(chǎn)品名稱: NK細(xì)胞性受體2DS3抗體交叉反應(yīng): Human
SLC4A4 variant A產(chǎn)品名稱: 碳suan氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4突變型抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)重組蛋白人Leupaxin蛋白(LPXN)ELISA試劑盒LPXNLeupaxin蛋白ELISA試劑盒Human Leupaxin(LPXN)ELISA Kit
人Lengsin蛋白(LGSN)ELISA試劑盒LGSNLengsin蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Lengsin(LGSN)ELISA Kit
人Lebercilin蛋白(LCA5)ELISA試劑盒LCA5Lebercilin蛋白elisa檢測試劑盒Human Lebercilin(LCA5)ELISA Kit
人Laforin蛋白(LDE)ELISA試劑盒LDELaforin蛋白elisa kitHuman Laforin(LDE)ELISA Kit
人Ladinin人1蛋白(LAD1)ELISA試劑盒LAD1Ladinin1蛋白ELISA試劑盒Human Ladinin 1(LAD1)ELISA Kit