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          胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-03-22 22:30:48瀏覽次數(shù):231

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
          貨號(hào) YS-02X10076 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研使用    
          胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:谷受體KA1抗體Anti-EGF-R/FITC 熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgG
          真核翻譯起始因子3K抗體Anti-EGFR/FITC 熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子受體抗體IgG
          早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體Anti-EGFRvIII/FITC 熒光素標(biāo)記表皮生長(zhǎng)因子受體III型突變體抗體IgG
          EMSY蛋白抗體Anti-EGFR/PE 熒光素PE標(biāo)

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品名稱(chēng):胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基

          規(guī)格:100mL/125mL×4
          貨號(hào):YS-02X10076

          細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

          儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

          運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
          公司產(chǎn)品僅用于科研

          細(xì)胞特性:

          1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

          2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

          3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

          4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

          5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

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          細(xì)胞培養(yǎng)步驟

          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

          1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

          2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

          3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

          二. 細(xì)胞處理:

          1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

          2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

          注意事項(xiàng):

          1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

          2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

          3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

          4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

          5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

          TFPI/LACI /FITC 熒光素標(biāo)記組織因子途徑抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          抗蛇毒蛋白抗體  Snake poison Protein 0.2ml

          Synaptopodin 英文名稱(chēng): 突觸足蛋白抗體 0.1ml

          ETS2 英文名稱(chēng): 癌基因ETS2抗體 0.1ml

          Rhesus antibody Rh phospho-MAPKAPK5(Thr182) 磷酸化p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

          ASPP1(apoptosis stimulating protein of P53 1) p53凋亡刺激蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

          sTNF Alpha-RI(humen) 小鼠可溶性壞死因子-受體1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

           Phospho-ETK (Tyr40) 磷酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Rhesus antibody Rh MrpL12 線(xiàn)粒體核糖體蛋白L12抗體 規(guī)格 0.1ml

          N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人新生兒促甲狀腺素 96T

          Somatostatin 英文名稱(chēng): 生長(zhǎng)抑素抗體 0.1ml

          Cathepsin S 英文名稱(chēng): 組織蛋白酶S抗體 0.2ml

           Phospho-ETK (Tyr40) 磷酸化非受體性蛋白酪激酶ETK抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

          Goat  Mouse IgM/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml

          Factor X heavy chain 英文名稱(chēng): 凝血因子10抗體 0.2ml

          B和T細(xì)胞衰減蛋白抗體  CD272/BTLA 0.1ml

           Nrn1/Cpg15/FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

          Rhesus antibody Rh PLGF/PIGF (mouse, rat, pig) 胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體(小鼠、大鼠、豬) 規(guī)格 0.1ml

           VWF/PE 熒光素PE標(biāo)記血管性血友病因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
          胎兒真皮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基環(huán)境鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次棕櫚酸

          食物鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次新戊二醇

          飲料鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人Smad7 ELISA試劑盒,

          鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,α1-AGP ELISA kit

          酵母鈉離子(Na)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)ELISA試劑盒, AT2R-Ab ELISA kit

          細(xì)胞鈉離子(Na)濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人組織蛋白酶抗體(Cath Ab)ELISA試劑盒,Cath Ab ELISA

          組織鈉離子(Na)濃度熒光定量檢測(cè)試劑盒20次人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒,CT ELISA

          鋅(Zn)定量檢測(cè)試劑盒50次人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒,HCV-IgM ELISA

          氯(Cl)定量檢測(cè)試劑盒50次人血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒,Ang-Ⅰ ELISA

          血液鈣(Ca)定量檢測(cè)試劑盒50次人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒,FS ELISA

          血液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次人膽固醇(CH)ELISA試劑盒,CH ELISA

          體液鎂離子(Mg)濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒50次人前列腺素D合成酶(PTGDS)ELISA試劑盒,PTGDS ELISA

          血液鎂離子(Mg)濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒20次大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試劑盒,

          體液鎂離子(Mg)濃度酶反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒20次兔纖溶抑制因子/凝血酶活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒,

          通用型甘油三酯(triglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法20次霉素(AFT)ELISA試劑盒,

          使用步驟:

          一)準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑:根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

          (二)校正pH值:將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線(xiàn),加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

          (三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

          (四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

          (五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

           


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