詳細介紹
產品名稱:小鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基
規(guī)格:100mL/125mL×4
貨號:YS-02X10240
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細胞而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
TGF- Alpha(Mouse transforming growth factor Alpha) ELISA Kit 小鼠轉化生長因子αMulti-class antibodies規(guī)格: 48T
VE-cadherin/CD/VECD/FITC 熒光素標記上皮型鈣粘附分子/血管內皮鈣粘蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey rabbit IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗兔IgG 規(guī)格 0.1ml
PLH 催乳素 96T
Maltose Binding Protein/MBP 英文名稱: 麥芽糖結合蛋白抗體 0.2ml
ATP13A2 英文名稱: 帕金森病相關蛋白ATP13A2抗體 0.2ml
VE-cadherin/CD/VECD/FITC 熒光素標記上皮型鈣粘附分子/血管內皮鈣粘蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
IFN- Omega (Human Interferon Omega ,IFN- Omega ) ELISA Kit 人ω干擾素Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse human IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗人IgM 規(guī)格 0.1ml
ST3(Human Stromelysin-3) ELISA Kit 人基質裂解素 96T
S100A7 英文名稱: S100鈣結合蛋白A7抗體 0.2ml
CCDC125 英文名稱: 卷曲螺旋結構域蛋白125抗體 0.2ml
Phospho-FoxO1 (Ser256) 磷酸化叉頭蛋白家族1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Mouse rabbit IgG/RBITC 羅丹明標記的小鼠抗兔IgG 0.3ml
GCLC 英文名稱: γ谷酰半胱酸合成酶抗體(γ-GCSc) 0.2ml
ABCB6抗體 ABCB6 0.2ml
MTNR1A/MTR-1A /FITC 熒光素標記褪黑素受體1A/松果體素受體1A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRX/periaxin 軸周蛋白PRX抗體 規(guī)格 0.1ml
Urocortin 3/FITC 熒光素標記尿皮質素UCN3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
小鼠肺成纖維細胞*培養(yǎng)基組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒20次3-二甲酸
食物膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒20次乙酸銨
羥脯(HYP)含量高效液相色譜定量檢測試劑盒20次氯化鋁
細胞羥賴(hydroxylisine)含量比色法定量檢測試劑盒20次氯化錫
組織羥賴(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20次鉻酸銫
體液羥賴(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20次10-羥基-2-癸烯酸
植物羥賴(HYL)含量比色法定量檢測試劑盒20次二氫辣椒素
羥賴(HYL)含量高效液相色譜定量檢測試劑盒20次王不留行黃酮苷
細胞脯羥化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次大車前苷
組織脯羥化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次蒺藜
體液脯羥化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次依他尼酸
植物脯羥化酶(prolil hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次4-異丁基乙酰
細胞賴羥化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠胰島素原(PI)Elisa測定試劑盒
組織賴羥化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次小鼠抗心肌抗體(AMA)Elisa測定試劑盒
體液賴羥化酶(lysyl hydroxylase)活性比色法定量檢測試劑盒20次大鼠Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)Elisa測定試劑盒
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。