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          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-21 19:35:49瀏覽次數(shù):366

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          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)
          種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:RNA核suan外切mei2同源物(REXO2)重組蛋白英文名稱:Recombina RNA Exonuclease 2 Homolog (REXO2)松弛su/胰島su樣肽受體1(RXFP1)重組蛋白英文名稱:Recombina Relaxin/Insulin Like Family Peptide Receptor 1 (RXFP1)基質(zhì)金屬9(M

          詳細(xì)介紹

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白

          Recombinant Acid Sphingomyelinase (ASM)

          Homo sapiens (Human,人)

          商品介紹:

          SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase

          酶與激酶

          代謝通路

          神經(jīng)科學(xué)

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::溶酶體

          預(yù)測(cè)分子量:33.8kDa

          實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:His319~Pro579 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):6.6

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          Recombinant Human SECISBP2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human TGFB1I1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human NES宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human CD335宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   

          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          PIRH2產(chǎn)品名稱: 泛su連接mei抗體交叉反應(yīng): ROR beta產(chǎn)品名稱: 維甲suan相關(guān)孤兒受體β抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep

          CK18產(chǎn)品名稱: 細(xì)胞角蛋白18抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

          SLAMF7產(chǎn)品名稱: SLAMF7抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow

          GPR176產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          Leptin receptor產(chǎn)品名稱: 瘦su受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep

          phospho-AKT1 (Ser129)產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiB抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Horse

          ADAMTS13產(chǎn)品名稱: 整合su樣金屬蛋白mei與凝mei13型抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

          Biglycan產(chǎn)品名稱: 骨/軟骨蛋白多糖1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep   

          酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)重組蛋白人抗Q熱抗體(anti-Q-Ab)ELISA試劑盒anti-Q-Ab抗Q熱抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-Q fever antibody,anti-Q-Ab ELISA Kit

          人抗Mi2抗體(anti-Mi2-Ab)ELISA試劑盒anti-Mi2-Ab抗Mi2抗體elisa檢測(cè)試劑盒Human anti-Mi2-antibody ELISA Kit

          人抗Ku抗體(anti-Ku-Ab)ELISA試劑盒anti-Ku-Ab抗Ku抗體elisa kitHuman anti-Ku-antibody ELISA Kit

          人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒anti-IgA-Ab抗IgA抗體ELISA試劑盒Human anti-IgA antibody ELISA Kit

          人抗G2s抗體(IgG)ELISA試劑盒IgG抗G2s抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human anti-G2s antibody IgG ELISA Kit 


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