小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：胰高血糖素樣肽-2抗體Anti-MEK6/FITC 熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白酶MKK6抗體IgG
甘受體alpha 1/2/3型抗體Anti-MKK3/FITC 熒光素標(biāo)記抗絲裂原活化蛋白酶MKK3/6抗體IgG
抑制型G蛋白α3抗體Anti-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活

產(chǎn)品名稱：小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10310

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

MTHFR/FITC 熒光素標(biāo)記亞甲基四氫葉酸還原酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

 Ubiquitin/FITC 熒光素標(biāo)記泛素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

α-1抗胰糜蛋白酶抗體  AACT-α1 0.1ml

Mouse  Rabbit IgM/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

GFRAL 英文名稱： 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSAP 鞘脂激活蛋白原抗體 規(guī)格 0.1ml

 Ubiquitin/FITC 熒光素標(biāo)記泛素蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Human Pancreatic carcinoma markers-CA242 ELISA Kit 人胰腺癌標(biāo)志物CA242Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 HOXB4 HOXB4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MCP1/CCL2 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1 96T

ROBLD3 英文名稱： 胞內(nèi)接頭蛋白P14抗體 0.1ml

C1orf123 英文名稱： 1號染色體開放閱讀框123抗體 0.2ml

 HOXB4 HOXB4抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Guinea pig IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

GCN2 英文名稱： 蛋白激酶GCN2蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ABHD13 水解酶結(jié)構(gòu)域蛋白13抗體 規(guī)格 0.2ml

 Phospho-MKP1 (Ser359)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh RAB6B RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB6B抗體 規(guī)格 0.1ml

 TP II A/TOP2a/FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)酶ⅡA抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
小鼠成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基高效液相色譜法（HPLC）定量檢測試劑盒亥茅酚苷

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶4F3B（LEUKOTRINE B4）20次異鉤藤堿

活性高效液相色譜法（HPLC）定量檢測試劑盒蓮子

細(xì)胞色素P450亞酶51（羊毛甾醇1，4α去甲基化酶）活性20次

高效液相色譜法（HPLC）定量檢測試劑盒雌酮

體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶51（羊毛甾醇1，4α去甲基化酶）20次淀粉樣肽前體蛋白抗體流式組化

活性高效液相色譜法（HPLC）定量檢測試劑盒轉(zhuǎn)移生長因子–β3抗體流式組化

水質(zhì)安全檢測試劑專題BOC-L-脯

名稱規(guī)格L-纈甲酯鹽酸鹽

隱孢子蟲（Cryptosporidium）涂片吉姆莎（Giemsa）染色試劑盒50次L-丙甲酯鹽酸鹽

隱孢子蟲（Cryptosporidium）涂片施樂-尼爾森（Zielh-Nielson）染色試劑盒50次L-丙-谷二肽

隱孢子蟲（Cryptosporidium）涂片金洋抗酸（Kinyoung Acid Fast）染色試劑盒50次O-并三氮唑-N，N，N，N，-甲脲六氟磷酸酯

隱孢子蟲（Cryptosporidium）涂片熒光染色試劑盒10/20次N-乙酰-D-脯

賈第鞭毛蟲（Giardia）涂片惠特利三色（Wheatley's trichrome）試劑盒50次腺苷

賈第鞭毛蟲（Giardia）涂片熒光染色試劑盒10/20次2′-脫氧胸苷

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。