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          天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白

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          • 天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-22 09:54:22瀏覽次數(shù):279

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH)
          物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:蛋白激meiCε(PKCe)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Kinase C Epsilon (PKCe)胱天7(CASP7)重組蛋白英文名稱:Recombina Caspase 7 (CASP7)胱天7(CASP7)重組蛋白英文名稱:Recombina Caspase 7 (CASP7)

          詳細(xì)介紹

          商品介紹:

          BAH; CASQ2BP1; HAAH; JCTN; Junctin; Humbug; Junctate; Aspartyl/Asparaginyl Beta-Hydroxylase; Peptide-aspartate beta-dioxygenase

          酶與激酶

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

          預(yù)測(cè)分子量:26.2kDa

          實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

          片段與標(biāo)簽:Arg562~Arg753 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點(diǎn):8.6

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

          公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

          產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          物種

          天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白

          Recombinant Aspartate Beta Hydroxylase (ASPH)

          Homo sapiens (Human,人)

          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          圖片5.png

          圖片1.png


          相關(guān)產(chǎn)品:

          Recombinant Human TEMT宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

          Recombinant Human CXCL14宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human

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          Recombinant Human ECHS1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human   
          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          GCDGP15產(chǎn)品名稱: 囊性組織液體蛋白15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          DNase gamma產(chǎn)品名稱: 脫氧核糖核suanmeiγ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Horse, Rabbit

          SH2D4A產(chǎn)品名稱: 含SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D4A抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse

          SHB產(chǎn)品名稱: 含SH2結(jié)構(gòu)域接頭蛋白B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          EPHX2交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來(lái)源: Mouse

          LIM1產(chǎn)品名稱: LIM同源框蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Chimpanzee

          GPROPDR產(chǎn)品名稱: GPROPDR蛋白抗體產(chǎn)品別名: 岡比亞按蚊; 非洲瘧蚊;

          human CD4/APC-Cy7產(chǎn)品名稱: APC-Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD4單克隆抗體交叉反應(yīng): PAR3產(chǎn)品名稱: 蛋白mei激活受體3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep   

          天冬氨酸β羥化酶(ASPH)重組蛋白人細(xì)胞附著蛋白4(CYTH4)ELISA試劑盒CYTH4細(xì)胞附著蛋白4ELISA試劑盒Human Cytohesin 4(CYTH4)ELISA Kit

          人細(xì)胞附著蛋白3(CYTH3)ELISA試劑盒CYTH3細(xì)胞附著蛋白3elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Cytohesin 3(CYTH3)ELISA Kit

          人細(xì)胞附著蛋白2(CYTH2)ELISA試劑盒CYTH2細(xì)胞附著蛋白2elisa檢測(cè)試劑盒Human Cytohesin 2(CYTH2)ELISA Kit

          人細(xì)胞附著蛋白1(CYTH1)ELISA試劑盒CYTH1細(xì)胞附著蛋白1elisa kitHuman Cytohesin 1(CYTH1)ELISA Kit

          人細(xì)胞分裂周期因子23(CDC23)ELISA試劑盒CDC23細(xì)胞分裂周期因子23ELISA試劑盒Human Cell Division Cycle Protein 23(CDC23)ELISA Kit  
          注意事項(xiàng):

          1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

          2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

          3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

          4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

          5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作 

           


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