產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phosphodiesterase 12 (PDE12) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 09:40:30瀏覽次數(shù):214
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Phosphodiesterase 12 (PDE12) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:磷酸二酯酶12(PDE12)重組蛋白
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
英文名稱:Recombinant Phosphodiesterase 12 (PDE12)
2'-PDE; 2'-Phosphodiesterase; Mitochondrial deadenylase
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::分泌 預(yù)測分子量:39.0kDa 實際分子量:39kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Glu290~Val602 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:5.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Human SPINT1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human PHC2宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His-IF2DI Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human MEK1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal GST tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
Recombinant Human PBX1宿主: E.Coli標(biāo)簽: N-terminal His Tag規(guī)格: 50μg, 200μg, 1mg種屬: Human
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
Collagen I產(chǎn)品名稱: I型膠原單克隆抗體產(chǎn)品別名: I型膠原蛋白; 膠原蛋白1; 1型膠原蛋白;
MeCP2產(chǎn)品名稱: 甲基化CpG結(jié)合蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
C1orf174產(chǎn)品名稱: 1號染色體開放閱讀框174抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit
MCM4產(chǎn)品名稱: 微小染色體維持缺陷蛋白4抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit
PRRT1產(chǎn)品名稱: 富含脯氨suan跨膜蛋白1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Cat
PSMF1產(chǎn)品名稱: 蛋白mei體劑亞基PI31抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
LIMK1產(chǎn)品名稱: 單絲氨suan蛋白激mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
NF-M產(chǎn)品名稱: 中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow
Gigaxonin產(chǎn)品名稱: 巨軸索神經(jīng)蛋白GAN抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Nucleobindin 2產(chǎn)品名稱: 新的飽食分子蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
磷酸二酯酶12(PDE12)重組蛋白人腺嘌呤磷suan核糖轉(zhuǎn)移mei(APRT)ELISA試劑盒APRT腺嘌呤磷suan核糖轉(zhuǎn)移meielisa檢測試劑盒Human Adenine Phosphoribosyltransferase(APRT)ELISA Kit
人腺苷suan激mei8(AK8)ELISA試劑盒AK8腺苷suan激mei8ELISA試劑盒Human Adenylate Kinase 8(AK8)ELISA Kit
人腺苷suan激mei7(AK7)ELISA試劑盒AK7腺苷suan激mei7elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Adenylate Kinase 7(AK7)ELISA Kit
人腺苷suan激mei5(AK5)ELISA試劑盒AK5腺苷suan激mei5elisa檢測試劑盒Human Adenylate Kinase 5(AK5)ELISA Kit
人腺苷suan激mei4(AK4)ELISA試劑盒AK4腺苷suan激mei4elisa kitHuman Adenylate Kinase 4(AK4)ELISA Kit