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          末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)重組蛋白

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          更新時間:2023-03-22 21:19:18瀏覽次數(shù):337

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Deoxynucleotidyltransferase, Terminal
          物種 Bos taurus; Bovine (Cattle,牛) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          品牌 研生    
          末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:腦膜炎奈瑟菌PCR檢測試劑盒Neisseria meningitidisPCR腦膜炎奈瑟菌W135群(NM-W135)核suan檢測試劑盒腦膜炎奈瑟菌群PCR檢測試劑盒Neisseria meningitidis AAPCR腦膜炎奈瑟菌群探針法熒光定量PCR試劑盒Neisseria meningitidis Group腦膜炎奈瑟菌PCR

          詳細介紹

          圖片6.png

          公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱:末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶(DNTT)重組蛋白   

          物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

          英文名稱:Recombinant Deoxynucleotidyltransferase, Terminal (DNTT)

          TDT; Terminal Deoxynucleotidyl Transferase; DNA Nucleotidylexotransferase; Terminal Transferase; Terminal addition enzyme; DNA nucleotidylexotransferase

          酶與激酶

          物種:Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

          來源:原核表達

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細胞定位::細胞核

          預(yù)測分子量:63.4kDa

          實際分子量:63kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Met1~Ala520 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點:8.7

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          相關(guān)產(chǎn)品:
          絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)重組蛋白Recombinant Ribonuclease A8 (RNASE8)

          絲裂原激活蛋白激酶11(MAPK11)重組蛋白Recombinant Ribonuclease A6 (RNASE6)

          絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重組蛋白Recombinant Ribonuclease A7 (RNASE7)

          絲氨酰tRNA合成酶2(SARS2)重組蛋白Recombinant Lipase, Monoacylglycerol (MGL)

          標(biāo)簽選擇:

          親和標(biāo)簽:蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類:一類是短肽類標(biāo)簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析。

          不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

          真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

          b.      表達載體的構(gòu)建

          c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

          d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

          e.      表達小試,條件優(yōu)化

          f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

          g.      大量表達

          h.      親和純化

          i.        檢測和鑒定

          原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

          a.      選擇表達載體

          b.      密碼子優(yōu)化

          c.      基因合成/亞克隆

          d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

          e.      蛋白表達小試分析

          f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

          g.      如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

          h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

          GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

            誘導(dǎo)表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應(yīng)該順當(dāng),按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

          操作步驟

          根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

          1、樣品前處理:

          a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

          b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

          c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

          2、后處理:

          將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

          特點:

          標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結(jié)合是一種非常簡便、直接的標(biāo)記方法。

          酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時可見、敏感性高。

          熒光標(biāo)記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

          KRV-VP1 + KRV-VP2 (C-terminus)產(chǎn)品名稱: 基爾曼氏細小毒VP1/VP2,大鼠潛在毒KRV抗體標(biāo)記: Unconjugated

          PRR15產(chǎn)品名稱: 富含脯氨suan蛋白15抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          Urokinase產(chǎn)品名稱: 尿激mei型纖溶mei原激活因子抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          CWH43產(chǎn)品名稱: 細胞壁合成蛋白43抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

          CD43產(chǎn)品名稱: CD43單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian

          RNF149產(chǎn)品名稱: 環(huán)指蛋白149抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          GFRAL產(chǎn)品名稱: 膠質(zhì)細胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1樣蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit

          LIX1產(chǎn)品名稱: LIX1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit

          GLK產(chǎn)品名稱: 葡萄糖激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

          ANKRD40產(chǎn)品名稱: 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
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