細(xì)胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9844
細(xì)胞生長實驗 :細(xì)胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準(zhǔn)確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
XAF1/FITC 熒光素標(biāo)記XIAP相關(guān)因子1凋亡抑制蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated gen-4) 細(xì)胞相關(guān)抗原4/細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗體 α-AF/α-Afa 0.1ml
ZNF423 英文名稱: 鋅指蛋白423抗體 0.2ml
DGAT1 英文名稱: 二脂酰甘油?;D(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-FAK(Tyr861) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
CTLA-4/CD152(cytotoxic T-lymphocyte associated gen-4) 細(xì)胞相關(guān)抗原4/細(xì)胞毒性T細(xì)胞抗原-4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
C5b-9 末端補體復(fù)合物抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh PDPK1 3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.2ml
Caspase3 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
TGF alpha 英文名稱: 轉(zhuǎn)移生長因子α抗體(TGFα) 0.1ml
CC16 英文名稱: 克拉拉細(xì)胞蛋白抗體 0.1ml
C5b-9 末端補體復(fù)合物抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Bovine IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
Factor VIII 英文名稱: 凝子8/第八凝血子/第八因子相關(guān)抗原抗體 0.1ml
胰高血糖素樣肽-2抗體 GLP-2 0.2ml
phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SHIP1 (Tyr1020) 磷酸化SH2結(jié)構(gòu)含磷酸肌醇SHIP1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Guinea IgG 兔抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
發(fā)綠色熒光的小鼠胚胎干細(xì)胞;G1紅色熒光細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒500次L-甘-酪二肽
磺酰羅丹明B(Sulforhodamine B)細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒100次小鼠多巴(DA)ELISA試劑盒,
考馬斯亮藍(lán)細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測試劑盒500次小鼠的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒,
XTT比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500次小鼠性休克綜合征素1(TSST-1)ELISA試劑盒,
CCK-1(水溶性氮唑-1 )比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500次小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒,
CCK-8(水溶性氮唑-8) 比色法細(xì)胞繁殖測定試劑盒500次小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA試劑盒,
酚藏花紅(PHENOSAFRANINE)植物細(xì)胞繁殖測定試劑盒100次兔子球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒,
二乙酸熒光素(Fluorescein diacetate)植物細(xì)胞繁殖測定試劑盒100次兔子巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒,
伊文思藍(lán)(EVANS BLUE)植物細(xì)胞繁殖測定試劑盒100次兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒,
蟲卵細(xì)胞活力和死亡熒光定量檢測試劑盒50次活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒--動物,人
蟲卵細(xì)胞活力和死亡體外裂卵(in vitro excystation)定量檢測試劑盒20次Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒--動物,人
蟲卵細(xì)胞活力和死亡細(xì)胞流式定量檢測試劑盒20次8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒--動物,人
細(xì)胞篩選試劑專題皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒--動物,人
名稱規(guī)格L-正纈
染色體核型吉姆莎染色分析試劑盒100次小鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒,