大鼠肝細(xì)胞;BRL相關(guān)熱銷產(chǎn)品：卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白CHCHD1抗體Anti-MyD88 髓樣分化蛋白抗體
ATP依賴的解旋酶CHD3抗體Anti-NIPP1/ARD1 核抑制蛋白磷酸酶1抗體
碳酸酐酶7抗體Anti-Myelin Protein Zero 外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白抗體
膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長(zhǎng)因子結(jié)構(gòu)域1抗體Anti-PMP2 周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體

產(chǎn)品名稱：大鼠肝細(xì)胞;BRL

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9547

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

Phospho-MSK1 (Ser360)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白原IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

抗三聚氰胺抗體  Melamine 0.2ml

Mouse  Rabbit IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

GPR88 英文名稱： G蛋白偶聯(lián)受體88抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體 規(guī)格 0.2ml

Rabbit  human Fibrinogen/FITC 熒光素標(biāo)記纖維蛋白原IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Integrin alpha 1 整合素α1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 Adiponectin receptor 2 脂聯(lián)素受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-cdc25A (Ser177) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25抗體 規(guī)格 0.1ml

蘇木精染色液-藍(lán)色 12ml/500ml 配合AEC,DAB,BCIP/NBT,Fast Red使用

VEGFR3 英文名稱： 血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.1ml

DUSP10 英文名稱： 雙特異性蛋白磷酸酶10抗體 0.2ml

 Adiponectin receptor 2 脂聯(lián)素受體2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Phospho-PLC beta3 (Ser537) 英文名稱： 磷酸化磷酯酶Cβ3抗體 0.1ml

phospho-EIF4EBP1(Ser111) 英文名稱： 磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

血管活性腸肽抗體  VIP 0.1ml

 TSFP1/SP1 /FITC 熒光素標(biāo)記SP1轉(zhuǎn)錄生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 規(guī)格 0.1ml

TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
大鼠肝細(xì)胞;BRL2',7'-二氯熒光素(>95.0%(HPLC))去氫二異丁香酚超長(zhǎng)鏈脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

2,3-二氨基萘(>98.0%(GC)(T))川楝素脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

溴甲菲啶(>95.0%(HPLC)(N))安五脂素組織短鏈脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

7-(二甲基氨基)-4-甲基(>95.0%(GC)(T))23-乙酰澤瀉B組織中鏈脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

7-(二甲基氨基)-4-三氟甲基(>97.0%(GC)(T))紫草苷組織長(zhǎng)鏈脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

2,3-二苯基馬來(lái)酸酐(>95.0%(GC))3,6-二芥子?；崽墙M織超長(zhǎng)鏈脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

7-(二乙基氨基)-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷組織脂酰A脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）總活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

[[(3,5-二甲基-1H-吡咯-2-基)(3,5-二甲基-2H-吡咯-2-亞基)甲基]](二氟烷)(>98.0%(GC))遠(yuǎn)志口山酮短鏈烯脂酰A水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。