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          土壤蔗糖酶(S-SC)操作流程

          閱讀:307          發(fā)布時間:2021-7-12

          土壤蔗糖酶(S-SC)操作流程:

          1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
          2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
          3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
          4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
          5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
          6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
          7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

          樣本收集與前處理:
          血清(漿)可直接測定。
          紅細(xì)胞:需按照試劑盒中說明書上紅細(xì)胞的測定方法進(jìn)行提取后測定。
          動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
          培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。

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