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          技術文章

          谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)樣本處理及要求

          閱讀:435          發(fā)布時間:2021-7-7

          谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)樣本處理及要求:

          1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
          仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
          2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
          3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
          4.細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
          5.組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
          6.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
          7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

          CaseinacidsHydrolysate 100g/250g/1kg/5kg原裝 Sigma A2427
          (酸水解酪素)
          CaseinEnzymaticHydrolysate 100g/250g/1kg/5kg原裝 Sigma C0626
          (酶水解酪素)
          Casitone 500g原裝/10kg原裝 BD 225910
          (酪胨
          (酪蛋白胨))
          Casitone 250g/1kg 國產
          (酪胨
          (酪蛋白胨))
          Catalase 1g/5g/10g原裝 Sigma C9322
          (過氧化氫酶
          (牛肝))
          CefotaximeNaSalt 100mg/500mg/1g原裝 INALCO1758-9318
          (噻孢霉素)
          Cellulase“Onozuka”R-10 1g/5g/10g/100g原裝 Yakult.JAPAN
          (纖維素酶R-10)
          CelluloseCM-52 100g/500g原裝 Whatman4037050
          (纖維素CM-52)

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