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小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子elisa試劑盒試劑配制步驟
閱讀:235 發(fā)布時間:2020-3-12小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子elisa試劑盒試劑配制:
1、酶聯(lián)板Assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品Standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液Sample Diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液Biotin-antibody Diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體Biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素HRP-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液TMB e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液Wash Buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液Stop Solution:1×10ml/瓶2N H2SO4。優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心酶標免疫分析法測定標本中AIF水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入AIF抗原、生物素化的抗小鼠AIF抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的AIF呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度OD值,計算樣品濃度。