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豬組織因子(TF)ELISA試劑盒操作的一些注意事項(xiàng)
閱讀:240 發(fā)布時(shí)間:2019-6-19豬組織因子(TF)ELISA試劑盒檢測(cè)原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被樣本抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的樣本呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
豬組織因子(TF)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明書(shū)操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5倍,終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
豬組織因子(TF)ELISA試劑盒試劑盒組成
名稱 96孔配置 48孔配置 備注
微孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條 無(wú)
樣本稀釋液 6mL 3mL 無(wú)
檢測(cè)抗體-HRP 10mL 5mL 無(wú)
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋
底物A 6mL 3mL 無(wú)
底物B 6mL 3mL 無(wú)
終止液 6mL 3mL 無(wú)
封板膜 2張 2張 無(wú)
說(shuō)明書(shū) 1份 1份 無(wú)
自封袋 1個(gè) 1個(gè) 無(wú)
注:標(biāo)準(zhǔn)品濃度都不相同,麻煩聯(lián)系客服索取相應(yīng)說(shuō)明書(shū)
試劑的準(zhǔn)備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
豬組織因子(TF)ELISA試劑盒洗板方法
1. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
2. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。