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細(xì)胞株凍存技術(shù)
閱讀：331 發(fā)布時(shí)間：2018-7-3細(xì)胞株實(shí)驗(yàn)室低溫保存設(shè)備包括：液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低溫保存箱、-86℃超低溫冰箱、程控降溫儀、低溫冰箱（-20℃、-30℃、-40℃）、藥品保存箱、疫苗保存箱、血庫冰箱、層析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。
檢驗(yàn)冰箱可靠性和制冷能力的方法：1、常規(guī)冰箱放置溫度計(jì)；2、超低溫冰箱放置加熱器、大量樣品或反復(fù)開門
很多化合物都可以作為凍存保護(hù)劑，它們既可以單獨(dú)使用也可以聯(lián)合使用，例如糖、血清和去污劑。雖然凍存沒有準(zhǔn)則，但是大家普遍認(rèn)為二甲基亞砜（DMSO）和甘油是保護(hù)活細(xì)胞和組織使用zui廣泛且zui有效的凍存保護(hù)劑。其他凍存保護(hù)劑可根據(jù)情況使用，可單獨(dú)使用也可聯(lián)合使用，包括：聚乙烯乙二醇（polyethylene glycol），丙烯乙二醇（propylene glycol），甘油（glycerine），聚乙烯吡咯烷酮（polyvinylpyrolidone），山梨醇（sorbitol），右旋糖苷（dextran），海藻糖（trehalose）。
凍存組織和整個(gè)器官的需求，促進(jìn)了凍存方法的發(fā)展，新方法也提高了凍存細(xì)胞和有機(jī)體的復(fù)蘇。這些方法包括改變凍存保護(hù)劑的濃度和加入添加劑，避免凍存過程引發(fā)的細(xì)胞調(diào)亡或 程序性死亡。多年來人們一直認(rèn)為，是凍存過程中產(chǎn)生的細(xì)胞內(nèi)物理變化或損壞，造成凍存后細(xì)胞的死亡。而zui近有研究發(fā)現(xiàn)，一些更為精細(xì)的胞內(nèi)活動(dòng)可能導(dǎo)致了細(xì)胞死亡，而這些活動(dòng)可在一定程度上受控于適當(dāng)?shù)膬龃嫣砑觿?/p>
凍存過程中，凍存保護(hù)劑有多種功能。例如，DMSO 可以降低冰點(diǎn)，促進(jìn)細(xì)胞在胞內(nèi)冰晶形成之前脫水更加*。普遍認(rèn)為，當(dāng)凍存保護(hù)劑可有效穿透細(xì)胞，延遲胞內(nèi)冰晶形成，降低溶液效應(yīng)時(shí)，凍存保護(hù)的效果*。另外，需要根據(jù)凍存的細(xì)胞類型來選擇凍存保護(hù)劑。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞來說，甘油是更好的選擇，因?yàn)樗亩拘员菵MSO 小。但是，DMSO 具有更好的滲透性， 通常作為較大型較復(fù)雜的細(xì)胞凍存，如原生生物。在添加到細(xì)胞株懸液之前，凍存保護(hù)劑應(yīng)該用新鮮培養(yǎng)基稀釋到適宜濃度，這能zui小化潛在的化學(xué)反應(yīng)損害，并確保細(xì)胞能均一接觸到保護(hù)劑，減少毒害效應(yīng)。DMSO 和甘油通常使用的濃度范圍為 5-10%（v/ v）。除了用于植物細(xì)胞，二者一般不聯(lián)合使用。
鋅指蛋白474IgG 大鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α (sm Actinin-α )
鋅指脂蛋白-1aIgG 大鼠黑色素(MC Ab)
鋅指脂蛋白-1bIgG 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)
鋅指脂蛋白-1cIgG 大鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)
鋅指脂蛋白217IgG 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)
鋅指轉(zhuǎn)錄因子SlugIgG 大鼠核因子κB(NF-κB)
新的飽食分子蛋白IgG 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2(Tie-2)
新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白IgG 大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)
新型血管活性因子UCN（人）IgG 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)
細(xì)胞株