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          技術(shù)文章

          原代細(xì)胞增殖生長數(shù)值的步驟

          閱讀:107          發(fā)布時間:2018-4-17

          測定原代細(xì)胞增長數(shù)值常用zui簡便的方法。

          一般過程為

          1. 接種21 孔/24 孔板細(xì)胞(如用培養(yǎng)瓶時則21 瓶)。

          2. 分7 組,每組3 孔(或瓶),培養(yǎng)一周(7 天),期間逐日檢測一組,計數(shù)。

          3. 把7 天中的細(xì)胞數(shù)值繪成圖,即為細(xì)胞生長曲線。
          實驗材料    
          細(xì)胞
          試劑、試劑盒    
          胰蛋白酶
          儀器、耗材    
          吸管
          實驗步驟    1. 懸液制備

          取待測生長狀態(tài)良好細(xì)胞,增長至接近匯合時,向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1 ml升0.25 %胰蛋白酶液,37 ℃溫箱中消化,至細(xì)胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細(xì)懸液、計數(shù);

          2. 接種

          向每孔中接種等量細(xì)胞,置溫箱中培養(yǎng);把培養(yǎng)瓶中營養(yǎng)液倒入試管中并記錄下毫升量;

          3. 計數(shù)檢測

          從次日起,即開始檢測*組每個孔(或瓶)中的細(xì)胞總數(shù),用計算盤或用細(xì)胞自動計數(shù)器計數(shù),取3 個孔的均值,如此至第7 組結(jié)束;

          4. 繪圖

          用座標(biāo)圖紙繪成生長曲線。
          收起
          注意事項    
          1. 計數(shù)法簡便易行,但不夠,約有20 %~30 %的誤差。為提高準(zhǔn)確性,每孔也應(yīng)計算2~3 次,則總和每組計算總次數(shù)達(dá)6 次~12 次,均值可能更為。

          2. 原代細(xì)胞數(shù)量增加1 倍的時間稱倍增時間,亦可從細(xì)胞生長曲線中測知。
          Neotame Related Compound A    15mg    紐甜相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品    
          Nevirapine Anhydrous     100mg    無水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品    129618-40-2 
          Nevirapine Hemihydrate     100mg    半水奈韋拉平標(biāo)準(zhǔn)品    129618-40-2 
          N-Glycolylneuraminic Acid     200mg    N-羥乙酰神經(jīng)氨酸標(biāo)準(zhǔn)品    1113-83-3 
          Niacin    200mg    煙酸標(biāo)準(zhǔn)品    59-67-6
          Niacinamide (Vitamin B3)    500mg    煙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品    98-92-0 
          Nicotine Bitartrate Dihydrate     500mg    二水合重酒石酸尼古丁標(biāo)準(zhǔn)品    6019/6/3
          Nifedipine     125mg    硝苯地平標(biāo)準(zhǔn)品    21829-25-4 
          Nimodipine     125mg    尼莫地平標(biāo)準(zhǔn)品    66085-59-4 
          Nitazoxanide    200mg    硝唑尼特標(biāo)準(zhǔn)品    55981-09-4 
          原代細(xì)胞

           

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