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在進(jìn)行腫瘤細(xì)胞分選前，保留一小部分起始樣本是非常重要的。這樣有助于評(píng)估分選前樣品中目標(biāo)細(xì)胞的比率及分選后該細(xì)胞的回收率。

各種組織和細(xì)胞來源中的細(xì)胞比率可以根據(jù)已發(fā)表的數(shù)據(jù)來估算。然而，實(shí)際操作中，細(xì)胞比率可能因供體而異，并且取決于是否來自正常的、患病的還是轉(zhuǎn)基因的樣本。

細(xì)胞回收率：

計(jì)算分選后的細(xì)胞回收率是評(píng)估實(shí)驗(yàn)是否成功的寶貴工具。需要準(zhǔn)確地得到以下四個(gè)數(shù)據(jù)： 

分選前起始樣本中的細(xì)胞總數(shù)*
目標(biāo)細(xì)胞在起始樣本中的比率*
分選后的細(xì)胞總數(shù)
分選后目標(biāo)細(xì)胞的純度

使用以下公式計(jì)算細(xì)胞回收率：
回收率 = [(3) x (4)] / [(1) x (2)] X 100%

*為方便起見，您可以在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)將預(yù)留的起始樣本與您的分選后（富集）樣本一并進(jìn)行分析。 

細(xì)胞總數(shù)：

起始樣本和富集樣本中的細(xì)胞總數(shù)可以通過的細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定。理想情況下，應(yīng)評(píng)估有核細(xì)胞（TNC）的總數(shù)和細(xì)胞活率，但是計(jì)算細(xì)胞回收率只需要TNC計(jì)數(shù)。如果使用自動(dòng)化系統(tǒng)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，需注意僅計(jì)數(shù)白細(xì)胞（排除紅細(xì)胞）。 

目標(biāo)腫瘤細(xì)胞的純度：
起始樣本和富集樣本中目標(biāo)細(xì)胞的比率（或純度百分比）可以通過流式細(xì)胞儀來確定。細(xì)胞分選試劑盒的產(chǎn)品說明書為如何評(píng)估該特定細(xì)胞的純度提供了建議。要注意，一些陽性分選試劑盒可能存在表位占據(jù)問題，因此需要遵循產(chǎn)品說明書的指示，以確保準(zhǔn)確地評(píng)估細(xì)胞純度（例如使用特異性抗體克隆，或在進(jìn)行細(xì)胞分選時(shí)，同時(shí)加入染色抗體和分選抗體混合物）。另外，需要注意對(duì)活細(xì)胞設(shè)門以提高準(zhǔn)確性。
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腫瘤細(xì)胞