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（一）原代細(xì)胞計數(shù) 
1、將血球計數(shù)板及蓋片用擦試干凈，并將蓋片蓋在計數(shù)板上。 
2、將細(xì)胞懸液吸出少許，滴加在蓋片邊緣，使懸液充滿蓋片和計數(shù)板之間。 
3、靜置3分鐘。 
4、鏡下觀察，計算計數(shù)板四大格細(xì)胞總數(shù)，壓線細(xì)胞只計左側(cè)和上方的。然后按下式計算： 
細(xì)胞數(shù)/ml＝4大格細(xì)胞總數(shù)/ 4×10000 
注意：鏡下偶見由兩個以上細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán)，應(yīng)按單個細(xì)胞計算，若細(xì)胞團(tuán)占10%以上，說明分散不好，需重新制備細(xì)胞懸液。 
（二）原代細(xì)胞活力 
1、將細(xì)胞懸液以0.5ml加入試管中。 
2、加入0.5ml 0.4%臺盼蘭染液，染色2一3分鐘。 
3、吸取少許懸液涂于載玻片上，加上蓋片。 
4、鏡下取幾個任意視野分別計死細(xì)胞和活細(xì)胞數(shù)，計細(xì)胞活力。 
死細(xì)胞能被臺盼蘭染上色，鏡下可見深蘭色的細(xì)胞，活細(xì)胞不被染色，鏡下呈無色透明狀。 
活力測定可以和細(xì)胞計數(shù)合起來進(jìn)行，但要考慮到染液對原細(xì)胞懸液的加倍稀釋作用。 
（三）MTT法測細(xì)胞相對數(shù)和相對活力 
活細(xì)胞中的琥珀酸脫氫酶可使MTT分解產(chǎn)生蘭色結(jié)晶狀甲贊顆粒積于細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞周圍。其量與細(xì)胞數(shù)呈正比，也與細(xì)胞活力呈正比。 
l、細(xì)胞懸液以1000rpm離心10分鐘，棄上清液。 
2、沉淀加入0.5－1ml MTT，吹打成懸液。 
3、37℃下保溫2小時。 
4、加入4—5 ml酸化異丙醇（定容）。打勻。 
5、1000 rpm離心，取上清液酶標(biāo)儀或分光光度計570nm比色，酸化異丙醇調(diào)零點(diǎn)。 
注意：MTT法只能測定原代細(xì)胞相對數(shù)和相對活力，不能測定細(xì)胞數(shù)。 
附：1、0.4%臺盼蘭染液配制： 
臺盼蘭 0.4克 加雙蒸水至100 ml。 
2、MTT配制： 
MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液或無酚紅的基礎(chǔ)液中。4℃下保存。 
3、酸化異丙醇配制： 
異丙醇中加入HCl使zui終達(dá)0.04mol/L。