詳細(xì)介紹
資源名稱: 嗜酸乳桿菌培養(yǎng)
種屬:Lactobacillus acidophilus
安全等級 1
模式菌株 no
應(yīng)用領(lǐng)域 分離源:發(fā)酵劑
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 MRS:酪蛋白胨 10.0克, 牛肉浸取物 10.0克, 酵母提取液 5.0克, 葡萄糖 5.0克, 乙酸鈉 5.0克, 檸檬酸二胺 2.0克, 吐溫80 1.0克, 磷酸氫二鉀 2.0克, 七水硫酸鎂 0.2克 ,七水硫酸錳 0.05克 ,碳酸鈣 20.0克, 瓊脂 20.0克 蒸餾水 1.0升, pH6.8
生長條件 37℃,厭氧
嗜酸乳桿菌培養(yǎng)注意事項:
1. 取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。
2. 凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO)對細(xì)胞不是*無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作 較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液*融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。
3. 離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。
4. 離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除 DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大, 死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液 體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無有異常。
5. 細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15m培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。
6. 復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。
7. 加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題是DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響 細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是 10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
服務(wù)保障:我們擁有的技術(shù)指導(dǎo)團(tuán)隊,對每售出的每件產(chǎn)品,提供全面的售前、售中和售后服務(wù)。保證*。
嗜酸乳桿菌培養(yǎng)檢測方法:
1.將病人標(biāo)本和/或液狀對照品放至室溫(15-30℃),輕輕混勻。測試前從包裝袋中取出檢測卡平放。
2.將1根Binax樣本拭子浸入要測試的標(biāo)本中,*浸沒拭子頭。如果拭子有滴水,將拭子靠在收集容器的邊上,排去多余的液體。
3.檢測卡內(nèi)部的右手邊有兩個孔,將拭子插入底部的孔中(拭子孔),穩(wěn)步向前推,使整個拭子頭在上部的孔中可見,不要取出拭子。
4.垂直持放A試劑瓶,高出檢測卡上方1/2到1英寸,慢慢向底部的孔中加入3滴A試劑。
5.立即從檢測卡的右緣揭去粘附襯,封閉檢測卡,過15分鐘在窗口判讀結(jié)果。15分鐘后讀取的結(jié)果可能不準(zhǔn)確。然而,有些陽性病人不到15分鐘就出現(xiàn)可見樣品線。
CAS9049-37-0 多聚半乳糖醛酸鈉鹽 1g
CAS9050-68-4 葡聚糖凝膠 G-10 25g
CAS9050-94-6 瓊脂糖凝膠 2B 100mL
CAS9054-89-1 超氧化物歧化酶 10Ku
CAS9064-47-5 組蛋白 25g
CAS9064-47-5 核酸組蛋白 ( 小牛胸腺 ) 250mg
CAS9067-32-7 透明質(zhì)酸鈉 1g
CAS9068-54-6 磷酸二酯酶Ⅱ 10U
CAS9068-59-1 中性蛋白酶 10mg
CAS9087-70-1 抑肽酶 2mg
CAS91079-38-8 牛肉蛋白胨 500g
CAS91079-38-8 蛋白胨 250g
CAS91079-40-2 酶水解酪素 100g
CAS91510-62-2 D- 半乳糖醛酸 1g
CAS921-62-0 6- 磷酸葡萄糖鋇鹽 100mg
CAS92-31-9 甲苯胺藍(lán) 5g
CAS92-32-0 吡啰紅 G 5g
CAS92-71-7 2,5- 二苯基惡唑 5g
CAS93-35-6 傘形酮 5g
CAS94-75-7 2,4- 二氯苯氧乙酸 5g
CAS95-54-5 鄰苯二胺 5g
CAS97-67-6 L- 蘋果酸 25g
CAS98185-20-7 S(-) 雷氯必利 (+)- 酒石酸鹽 25mg