詳細介紹
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928價格質(zhì)量保證:
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,*進口來源,*保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928價格操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928價格【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928價格
形態(tài)特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系來源于一成年男性的外周血。2009年由中科院昆明細胞庫通過EB病毒轉化的方法建立。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;5-6天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 A類
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0928價格細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng))。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
17-0130 NcoI 200U
22-0520-25 NBD-Cl 25mg
22-0510-25 NAO 25mg
23-0500-2 NAC( 抗氧化劑 ) 2g
CAS538-75-0 N,N,- 二環(huán)已基碳化二亞胺 25g
CAS10191-18-1 N,N- 雙 (2- 羥乙基 )-3- 氨基乙磺酸 5g
CAS616-91-1 N- 乙酰 -L- 半胱氨酸 5g
CAS7512-17-6 N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 5g
CAS29836-26-8 n- 辛基 -β-D- 吡喃葡萄糖苷 1g
131046-1 n- 十二烷基 -β-D- 麥芽糖苷 1g
CAS5704-04-1 N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基甘氨酸 10g
CAS7365-44-8 N- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -2- 氨基乙烷磺酸 5g
CAS3483-82-7 N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯 1g
CAS7365-82-4 N- 氨基甲酰甲基乙磺酸 5g
CAS150-25-4 N ,N- 雙 (2- 羥乙基 ) 甘氨酸 10g
111105-500 MTT 檢測試劑盒 500 次
140634-500 MTS 細胞增殖與細胞毒性檢測試劑盒 500 次
80817-25 mRNA 提取試劑盒 25 次
22-0500-20 MQAE( 氯離子熒光探針 ) 20mg
22-0490-25 Monobromobimane [mBBR] 25mg
23-0490-100 Monensin ( 蛋白轉運抑制劑 ) 100mg
130307-5 MnCl2溶液,25mM,PCR 級 5mL
131209-1000 MMLV 逆轉錄酶 (H-) 1000U
60905-10000 MMLV 逆轉錄酶 10000U
60905-50000 MMLV 逆轉錄酶 50000U
22-0480-1 MM4-64(FM®4-64) 1mg
22-0470-1 MM1-43(FM®1-43) 1mg
17-0110 Mlu 1000U
22-0460-50 Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 ) 50μL
131042-25 miRNA 熒光定量檢測試劑盒 25 次
70608-1.5 miRNA 尿素 -PAGE 上樣液 ,6× 1.5mL