詳細(xì)介紹
人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353*現(xiàn)貨直銷,免費(fèi)快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株,細(xì)胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細(xì)胞名稱 人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353*
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 SW 1353細(xì)胞zui初從一位72歲女性白人的右肱骨原發(fā)性II級(jí)骨肉瘤中得到。 zui初的培養(yǎng)基是含有和胰島素的L-15添加10%FBS和抗生素。 1982年1月ATCC收到1支傳代至12代的凍存管。
培養(yǎng)條件 L15: Leibovitz Medium 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(25+5)
凍存條件 *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人骨肉瘤細(xì)胞;SW 1353*運(yùn)輸保存:
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí),若干冰已經(jīng)*融化,請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用,請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞,切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲(chǔ)存:液氮。
運(yùn)輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性,支持客戶檢測對(duì)應(yīng)的biomarker,(如證明細(xì)胞錯(cuò)誤,全額退款。)公司針對(duì)每株細(xì)胞,鑒定gene background,鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細(xì)胞的真實(shí)性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
130420-1 Protein G 瓊脂糖 1mL
130850-1 Protein G 磁珠 1mL
131201-2 Protein A+G 瓊脂糖 2mL
130418-1 Protein A 瓊脂糖 1mL
130849-1 Protein A 磁珠 1mL
19-0190-100 PRMI1640 培養(yǎng)基 ( 含 10% 胎牛血清 ) 100mL
19-0180-100 PRMI1640 培養(yǎng)基 100mL
130876-100 PreScissiom 蛋白酶 100U
130620-60 Poly(U) 聚合酶 60U
131133-250 Poly(I).Poly(C) 250mg
120509-20 Poly(A) 聚合酶 20U
131132-100 Poly r(A) 100mg
131116-1 pNPP 干粉 1g
100833-5 PMSF 溶液,10mg/mL 5mL
23-0620-1 PMA/TPA (PKC 激活劑 ) 1mg
131290-250 PLPD 固定液 250 mL
131289-250 PLP 固定液 250 mL
23-0610-5 Pifithrin-a(p53 抑制劑 ) 5mg
130429-250 Phusion DNA 聚合酶 250U
23-0600-1 Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
51207-100 Pfu DNA 聚合酶 100U
131292-250 PFG 固定液 250 mL
131134-100 Percoll 100mL
23-0590-1 PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 1g
23-0580-2 PD 98059(MAPKK 抑制劑 ) 2mg