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雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片售后：收到細(xì)胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題（如污染，死亡，快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí)，應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真致銷(xiāo)售人員，我們將盡快為您解決。
詳細(xì)介紹
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱(chēng) 雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞株由陳松森教授實(shí)驗(yàn)室建立；雙位點(diǎn)Cys151和Cys183突變的c-Kit基因轉(zhuǎn)染293ET細(xì)胞，篩選獲得。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；IL-3 or rhGM-CSF
傳代方法 1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片質(zhì)量保證:
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，*進(jìn)口來(lái)源，*保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶(hù)手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶(hù)提供一次。
雙位點(diǎn)HC-kit受體細(xì)胞株；DMF7圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液?？刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
23-0260-25 Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 ) 25mg
23-0270-5 Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 ) 5g
23-0280-1 GSH( 抗氧化劑 ) 1g
23-0290-5 H-89.2HCL(PKA 抑制劑 ) 5mg
23-0300-1 H-89(PKA 抑制劑 ) 1mg
23-0310-1 HDAC 抑制劑 1g
23-0320-1 Hemoglobin(NO 清除劑 ) 1g
23-0330-18 Insulin 18mg
23-0340-250 Ionomycin( 鈣離子載體 ) 250nmol
23-0350-50 KT5823(PKG 抑制劑 ) 50μg
23-0360-5 L-Arginine(NO 前體 ) 5g
23-0370-20 L-Canavanine(iNOS 抑制劑 ) 20mg
23-0380-1 L-Citrulline(NO 中間體 ) 1g
23-0390-10 Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 ) 10μg
23-0400-1 L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 ) 1g
23-0410-0.5 Lipoic acid( 抗氧化劑 ) 0.5g
23-0420-200 L-NAME(eNOS 抑制劑 ) 200mg
23-0430-5 L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 ) 5mg
23-0440-10 Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 ) 10mg
23-0450-0.5 LPS(TLR4 激活劑 ) 0.5mg
23-0460-1 LY294002(PI3K 抑制劑 ) 1mg
23-0470-1 Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 ) 1g
23-0480-1 MG-132(Proteasome 抑制劑 ) 1mg
23-0490-100 Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)抑制劑 ) 100mg
23-0500-2 NAC( 抗氧化劑 ) 2g
23-0510-10 Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 ) 10g
23-0520-5 Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 ) 5mg
23-0530-1 NS-2028(sGC 抑制劑 ) 1mg
23-0540-1 NS-398(COX-2 抑制劑 ) 1mg
23-0550-1 Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 ) 1mg
23-0560-10 Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 ) 10μg
23-0570-100 Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 ) 100μL
23-0580-2 PD 98059(MAPKK 抑制劑 ) 2mg
23-0590-1 PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 1g
23-0600-1 Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
23-0610-5 Pifithrin-a(p53 抑制劑 ) 5mg
23-0620-1 PMA/TPA (PKC 激活劑 ) 1mg
23-0630-5 Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 5mg
23-0640-100 Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 ) 100μg
23-0650-1 SB203580(p38MAPK 抑制劑 ) 1mg
23-0660-10 Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 ) 10mg
23-0670-50 S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) 50mg
23-0680-100 SMT(iNOS 抑制劑 ) 100mg
23-0690-1 SNP(NO 供體 ) 1g
23-0700-65 SOD( 抗氧化酶 ) 65KU
23-0710-1 Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 ) 1g
23-0720-2 Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 ) 2g
23-0730-5 SP600125(JNK 抑制劑 ) 5mg
23-0740-1 Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 ) 1g
23-0750-0.1 Staurosporine(PKC 抑制劑 ) 0.1mg
23-0760-2 Superoxide dismutase( 抗氧化酶 ) 2mg