詳細介紹
人胚腎細胞(亞系克?。籉IP293*操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人胚腎細胞(亞系克?。?;FIP293*現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應(yīng)各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細閱讀本說明書。
產(chǎn)品名稱 | 人胚腎細胞(亞系克?。?;FIP293* |
用途 | 僅用科研 |
保存條件 | 4℃保存一年;-20℃長期保存 |
細胞名稱 人胚腎細胞(亞系克?。?;FIP293*
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 Rabll家族關(guān)聯(lián)蛋白(Rabll Family interacting protein)基因通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法,轉(zhuǎn)染293細胞,篩選得到穩(wěn)定表達的細胞株。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;100ug/ml Zeocin
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 B類
人胚腎細胞(亞系克?。?;FIP293*運輸保存:
采用干冰保存運輸。收到細胞時,若干冰已經(jīng)*融化,請立即將細胞復(fù)蘇培養(yǎng);若尚留有干冰,請立即將細胞放入液氮中保存待用,請按條件貯存細胞,切不可將細胞置于高溫環(huán)境。
保存條件:4℃保存一年;-20℃長期保存
用途:只可用于科研。
儲存:液氮。
運輸:干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一,周三,周五更換培養(yǎng)基。
注意:*次植入后,在6-16小時內(nèi)更換培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細胞。到達客戶手中,出現(xiàn)任何問題(人為或者非人為),導(dǎo)致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。對于細胞的真實性,支持客戶檢測對應(yīng)的biomarker,(如證明細胞錯誤,全額退款。)公司針對每株細胞,鑒定gene background,鑒定完成的細胞可以提供數(shù)據(jù),用于證明細胞的真實性,并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧毎匦浴?/p>
23-0260-25 Genistein( 酪氨酸蛋白激酶抑制劑 ) 25mg
23-0270-5 Glucosamine( 胰島素抵抗誘導(dǎo)劑 ) 5g
23-0280-1 GSH( 抗氧化劑 ) 1g
23-0290-5 H-89.2HCL(PKA 抑制劑 ) 5mg
23-0300-1 H-89(PKA 抑制劑 ) 1mg
23-0310-1 HDAC 抑制劑 1g
23-0320-1 Hemoglobin(NO 清除劑 ) 1g
23-0330-18 Insulin 18mg
23-0340-250 Ionomycin( 鈣離子載體 ) 250nmol
23-0350-50 KT5823(PKG 抑制劑 ) 50μg
23-0360-5 L-Arginine(NO 前體 ) 5g
23-0370-20 L-Canavanine(iNOS 抑制劑 ) 20mg
23-0380-1 L-Citrulline(NO 中間體 ) 1g
23-0390-10 Leptomycin B( 出核轉(zhuǎn)運抑制劑 ) 10μg
23-0400-1 L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 ) 1g
23-0410-0.5 Lipoic acid( 抗氧化劑 ) 0.5g
23-0420-200 L-NAME(eNOS 抑制劑 ) 200mg
23-0430-5 L-NMMA( 總 NOS 抑制劑 ) 5mg
23-0440-10 Lovastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 ) 10mg
23-0450-0.5 LPS(TLR4 激活劑 ) 0.5mg
23-0460-1 LY294002(PI3K 抑制劑 ) 1mg
23-0470-1 Metformin(LKB1-AMPK 激活劑 ) 1g
23-0480-1 MG-132(Proteasome 抑制劑 ) 1mg
23-0490-100 Monensin ( 蛋白轉(zhuǎn)運抑制劑 ) 100mg
23-0500-2 NAC( 抗氧化劑 ) 2g
23-0510-10 Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 ) 10g
23-0520-5 Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 ) 5mg
23-0530-1 NS-2028(sGC 抑制劑 ) 1mg
23-0540-1 NS-398(COX-2 抑制劑 ) 1mg
23-0550-1 Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 ) 1mg
23-0560-10 Okadaic acid 鉀鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 ) 10μg
23-0570-100 Paclitaxel(TAXOL)( 紫杉醇 ) 100μL
23-0580-2 PD 98059(MAPKK 抑制劑 ) 2mg
23-0590-1 PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 1g
23-0600-1 Phorbol12-myristate13-acetate(PKC 激活劑 ) 1mg
23-0610-5 Pifithrin-a(p53 抑制劑 ) 5mg
23-0620-1 PMA/TPA (PKC 激活劑 ) 1mg
23-0630-5 Pyrrolidinedithioca rbamin acid.ammonium salt(NF-kB 抑制劑 / 抗氧化劑 ) 5mg
23-0640-100 Rapamycin(FRAP/mTOR 抑制劑 ) 100μg
23-0650-1 SB203580(p38MAPK 抑制劑 ) 1mg
23-0660-10 Simvastatin(HMG-CoA Reductase 抑制劑 ) 10mg
23-0670-50 S-Methyl-ITU.sulfate(iN0S 抑制劑 ) 50mg
23-0680-100 SMT(iNOS 抑制劑 ) 100mg
23-0690-1 SNP(NO 供體 ) 1g
23-0700-65 SOD( 抗氧化酶 ) 65KU
23-0710-1 Sodium Butyrate(HDAC 抑制劑 ) 1g
23-0720-2 Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 ) 2g
23-0730-5 SP600125(JNK 抑制劑 ) 5mg
23-0740-1 Spermidine.trihvdrochloride(nNOS 抑制劑 ) 1g
23-0750-0.1 Staurosporine(PKC 抑制劑 ) 0.1mg
23-0760-2 Superoxide dismutase( 抗氧化酶 ) 2mg
23-0770-2 TLR4 激活劑 2mL
23-0780-2 Tocopherol( 抗氧化劑 ) 2g
23-0790-2 Trequinsin(PDE III 抑制劑 ) 2mg
23-0800-100 Trichostatin A(HDAC 抑制劑 ) 100μg
23-0810-1 U0126(MEK1/2 抑制劑 ) 1mg