詳細介紹
一抗和二坑的區(qū)別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。
第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統(tǒng)產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發(fā)生特異性結合的特殊蛋白質。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發(fā)光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。
中文名稱 | MS4A12蛋白抗體 |
英文名稱 | MS4A12 |
規(guī)格 | 50ul 100ul 200ul |
產品分類 | 抗體 / 一抗 |
英文別名 FLJ20217; Membrane spanning 4 domains subfamily A member 12.
英文別名 Human
標記 Unconjugated
抗體來源 Rabbit
抗體類型 Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MS4A12
蛋白細胞定位 細胞膜
純化方法 affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀 Liquid
濃度 1mg/ml
儲存液 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件 Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 The protein encoded by this gene is a cell surface protein found primarily in the apical membrane of colonocytes. Silencing of this gene in colon cancer cells inhibits the proliferation, cell motility,
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備 | 2. 免疫動物 | 4. 免疫血清 |
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。 小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。 | 常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。 3. 免疫血清的收集 一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。 | 純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化 ,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有 高效,特異性強,純度高的特定。接著要 鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、 純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建 議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。 |
抗體作用:
1、中和毒素和阻止病原體入侵,抗體在體外可發(fā)生各種抗原、抗體結合反應,有利于抗原或抗體檢測、功能判斷,在體內可中合毒素、阻斷病原體入侵、清除病原微生物。
2、激活補體產生攻膜復合物,使細胞溶解破壞,抗體與相應抗原結合后,可通過經典途徑激活補體系統(tǒng),產生多種效應功能。
3、調理吞噬和抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用,調理作用是指IgG抗體的FC段與中性粒細胞、巨噬細胞表面下段FC受體結合,從而增強吞噬細胞的吞噬作用。抗體依賴的細胞介導的細胞毒性作用是指具有殺傷活性的細胞,如NK細胞,通過其表面的FC受體,識別包被于靶細胞表面抗原上的抗體FC段,直接殺傷靶細胞。
4、介導Ⅰ型超敏反應。
5、穿過胎盤屏障和黏膜,IgG是能夠通過胎盤的抗體,對于新生兒的抗感染具有重要意義。
6、分泌型的IgA可通過呼吸道和消化道黏膜,在黏膜局部免疫中發(fā)揮重要的免疫防御作用。
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實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
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