免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品分類 | 抗體來(lái)源 |
DENND4A蛋白抗體 | 50ul、100ul、200ul | 抗體 / 一抗 | Rabbit |
規(guī)格 50ul 100ul 200ul
產(chǎn)品分類 抗體 / 一抗
英文名稱 :DENND4A
英文別名 :C-myc promoter-binding protein; DENN domain-containing protein 4A; DENN/MADD domain containing 4A; DENND4A; FLJ33949; IRLB; KIAA0476; MYCPBP; MYCPP_HUMAN.
交叉反應(yīng) :Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
標(biāo)記 :Unconjugated
抗體來(lái)源:Rabbit
抗體類型:Polyclonal
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human DENND4A
蛋白細(xì)胞定位:細(xì)胞核
純化方法:affinity purified by Protein A
亞型:IgG
性狀:Liquid
濃度:1mg/ml
儲(chǔ)存液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
背景資料 :
Encoding more than 700 es, chromosome 15 is made up of approximately 106 million base pairs and is about 3% of the human ome. Angelman and Prader-Willi syndromes are associated with loss of function or deletion of es in the 15q11-q13 region. |
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏佐劑和弗氏不佐劑
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
相關(guān)產(chǎn)品:
Active Acid Sphingomyelinase (ASM)產(chǎn)品名稱:酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)活性蛋白物種:Human,人SMPD1; NPD; SMase; aSMase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 1,Acid Lysosomal; Simply Sphingomyelinase
Recombinant N-Acetyltransferase 1 (NAT1)產(chǎn)品名稱:N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)重組蛋白物種:Human,人AAC1; Arylamine N-Acetyltransferase; Arylamide acetylase 1; Monomorphic arylamine N-acetyltransferase
Recombinant Ribosomal Protein S6 Kinase Alpha 1 (RPS6Ka1)產(chǎn)品名稱:核糖體蛋白S6激酶α1(RPS6Ka1)重組蛋白物種:Human,人HU-1; MAPKAPK1A; RSK; RSK1; S6K-alpha 1; 90 kDa ribosomal protein S6 kinase 1; MAP kinase-activated protein kinase 1a; Ribosomal S6 kinase 1
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為殘基,殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見(jiàn)。
下列是公司正銷售的產(chǎn)品:
ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 7大鼠前動(dòng)力蛋白2(PK2)ELISA試劑盒,英文名:PK2 ELISA Kit
高熊果酚苷 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
ELISA Kit for Human Transcription initiation factor TFIID subunit 1大鼠肌微管素相關(guān)蛋白9(MTMR9)ELISA試劑盒,英文名:MTMR9 ELISA Kit
甘草次十八酯 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
人補(bǔ)體成分9(C9)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL.小鼠基質(zhì)金屬抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒,英文名:TIMP-4 ELISA Kit
根薯內(nèi)酯B 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
ELISA Kit for Human Urotensin-2B大鼠低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白8(LRP8)ELISA試劑盒,英文名:LRP8 ELISA Kit
甘草二鉀 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
ELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B小鼠甘油-3-脫氫酶(GAPDH/G3PDH)ELISA試劑盒,英文名:GAPDH/G3PDH ELISA Kit
根薯內(nèi)酯A 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒人96T15.6-1000 pg/mL小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒,英文名:Gal-6S ELISA Kit
規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢
ELISA Kit for Human C-X-C motif chemokine 11小鼠α1性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒,英文名:α1-AGP ELISA Kit
骨化二 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
人肌激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒人96T0.312-20 ng/mL小鼠25羥基3(25 HVD3)ELISA試劑盒,英文名:25 HVD3 ELISA Kit
L- 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
DENND4A蛋白抗體人類似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 免疫試劑盒
20次 Southern Marker Oligo(DIG)
100U Sulfolobus DNA 聚合 IV Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存
兔抑瘤素M(OSM)免疫試劑盒
20次 DNA去化試劑盒 DNA Dephosphorylation Kit -20℃保存
大鼠腫瘤壞死因子(配體)超家族成員14(TNFSF14)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
志賀氏菌成套生化鑒定管(ZHGB) 16種*1套/盒*10盒/套
5mg 羧肽 B( 豬胰 ) Carboxypeptidase B -20℃保存
50T 腮腺炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
大鼠胰蛋白原-1 免疫試劑盒進(jìn)口、分裝