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          丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-22 09:22:03瀏覽次數(shù):171

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號(hào) GOY-01D2880 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Compone
          物種 Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)    
          丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬公司正在出售的產(chǎn)品:生長(zhǎng)激素抗體 英文名稱:Growth Hormone 0.1mlGDP甘露糖焦磷酸化酶抗體 英文名稱:GMPPA 0.2ml神經(jīng)細(xì)胞膜糖蛋白M6b 英文名稱:GPM6B 0.2ml

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          Recombinant Protein Kinase C Alpha (PKCa)產(chǎn)品名稱:蛋白激酶Cα(PKCa)重組蛋白物種:Mouse,小鼠PRKCA; PKC-A; AAG6; PKC-Alpha

          Recombinant Dipeptidase 2 (DPEP2)產(chǎn)品名稱:二肽酶2(DPEP2)重組蛋白物種:Human,人酶與激酶

          Recombinant Calpain 5 (CAPN5)產(chǎn)品名稱:鈣5(CAPN5)重組蛋白物種:Human,人HTRA3; nCL3; Calpain htra-3; New calpain 3

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號(hào)

          丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬

          Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

          GOY-01D2880

           

           

          英文名稱:Recombinant Pyruvate Dehydrogenase Complex Component X (PDHX)

          E3BP; proX; PDX1; OPDX; DLDBP; E3-binding protein; Dihydrolipoamide dehydrogenase-binding protein of pyruvate dehydrogenase complex

          型號(hào):GOY-01D2880

          酶與激酶

          物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::n/a

          預(yù)測(cè)分子量:51.6kDa

          實(shí)際分子量:54kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

          片段與標(biāo)簽:Pro54~Ala500 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):6.7

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          圖片3.png
          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

           

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

           

           

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基/BCP Glucase Peptone Water Medium用于壓力蒸汽滅菌效果評(píng)價(jià)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

          (S)-鹽d5  質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Fluoxetine-d5 Hydrochloride

           SKOV3/Taxol-25, 人卵巢耐藥細(xì)胞株

          琥珀酰 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluoxetine Succinamic Acid

           One Step Western Kit HRP (Mouse)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(鼠)50次2次、10次、50次gersion

          (S)-鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (S)-Fluoxetine Hydrochloride

           NCI-H226(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          d5 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluoxetine-d5 Hydrochloride

           EJ(人膀胱細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          (R)-鹽 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (R)-Fluoxetine Hydrochloride

           MCF7/腺細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)

          氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 Fluvoxamine Acid

           Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          (順式)氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 (Z) Fluvoxamine

           HEp-2(人喉表樣細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

          N-(2-丁二酰)氟伏沙明 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 N-(2-Succinyl) Fluvoxamine

          丙酮酸脫氫酶復(fù)合體成分X(PDHX)重組蛋白豬人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          2 ug pcDNA3.1 pcDNA3.1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          硝酸鹽蛋白胨水培養(yǎng)基 Nitrate peptone water medium 250g

          5g 溴甲紫 Bromocresol Purple 室溫保存

          人組胺(HIS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          2 ug pPICZα D pPICZα D 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          1000mL Tris Buffered Saline(TBS),20X  Tris Buffered Saline(TBS),20X  常溫保存

          胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA)(2015藥典) Tryptose Soya Agar 250g

          30次 一站式SDS-PAGE電泳套裝 One-Stop SDS-PAGE Pack 丙烯酰胺溶液4℃保存,上樣緩沖液需要-20℃保存,其余常溫保存

          人凋亡蛋白激活因子1(APAF1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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