詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2697 |
英文名稱:Recombinant Sphingosine Kinase 2 (SPHK2)
酶與激酶
型號(hào):GOY-01D2697
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測分子量:26.2kDa
實(shí)際分子量:28kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Gly18~Leu219 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):8.8
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
Recombinant Phospholipase A2, Group XIIB (PLA2G12B)產(chǎn)品名稱:ⅫB組磷脂酶A2(PLA2G12B)重組蛋白物種:Human,人PLA2G13; FKSG71; GXIIB; Phospholipase A2,Group XIII; Group XIIB secretory phospholipase A2-like protein
Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)產(chǎn)品名稱:肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白物種:Human,人CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain
Recombinant Tankyrase 1 Binding Protein 1 (TNKS1BP1)產(chǎn)品名稱:端錨聚合酶1結(jié)合蛋白1(TNKS1BP1)重組蛋白物種:Human,人TAB182
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
尼氏(Nissl)染色液規(guī)格:
己二二異丁酯(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) Diisobutyl Adipate
大鼠腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
己二二酯(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) Dipropyl Adipate
中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
己二雙(2-丁氧乙基)酯(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) Bis(2-butoxyethyl) Adipate
屎腸球菌 Enterococcus faecium
壬二二甲酯(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Dimethyl Azelate
NCI-H2227(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
油乙酯(>70.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>70.0%(GC) Ethyl Oleate
大鼠角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL
油乙酯(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) Ethyl Oleate
奇異變形桿菌 Proteus mirabilis
癸二二丁酯(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) Dibutyl Sebacate
凍膠假絲酵母 Candida gelida
癸二二甲酯(>97.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC) Dimethyl Sebacate
鞘氨醇激酶2(SPHK2)重組蛋白小鼠25g L- 鹽酸鹽 L-Histidine HCl 室溫干燥保存
人胍基丁胺脲水解/凝集(AGMAT)免疫試劑盒
明膠蛋白胨 Gelatin Peptone 250g
甲型流感H5N1(Avian Flu)HA 免疫試劑盒
人鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)抗體(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
50mL 肝素瓊脂糖 Heparin Agarose 4℃保存
25g DEAE葡聚糖凝膠 A-25 DEAE-Sephadex A-25 -20℃保存
5次 大提柱式質(zhì)粒 DNAout Maxi Column Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
兔子基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)免疫試劑盒
小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝