詳細介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D2672 |
英文名稱:Recombinant p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4)
Serine/threonine-protein kinase PAK 4
型號:GOY-01D2672
酶與激酶
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌
預測分子量:34.2kDa
實際分子量:20kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Ser46~Ile339 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:-
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品:
Recombinant Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1)產(chǎn)品名稱:類固醇5α還原酶1(SRD5a1)重組蛋白物種:Rat,大鼠3-Oxo-5 Alpha-Steroid Delta 4-Dehydrogenase Alpha 1
Recombinant Cathepsin E (CTSE)產(chǎn)品名稱:組織E(CTSE)重組蛋白物種:Human,人CTS-E; CATE
Recombinant Aldehyde Oxidase 1 (AOX1)產(chǎn)品名稱:乙醛氧化酶1(AOX1)重組蛋白物種:Cattle,牛AO; AOH1; Azaheterocycle hydroxylase
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
泡盛曲霉 Aspergillus awamori
4,4'-二氨基二甲(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 4,4'-Diaminobenzophenone
浸麻類芽胞桿菌 Paenibacillus macerans
4,4'-二二甲(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 4,4'-Dichlorobenzophenone
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
3,3'-二硝基二甲(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 3,3'-Dinitrobenzophenone
HCT-8(人盲腸腺細胞)5×106cells/瓶×2
3,3'-二氨基二甲(>95.0%(GC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)(T) 3,3'-Diaminobenzophenone
海棗曲霉 Aspergillus phoenicis
2,4'-二氟二甲(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC) 2,4'-Difluorobenzophenone
大鼠腦膜細胞培養(yǎng)基100mL
4,4'-二氟二甲(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(GC) 4,4'-Difluorobenzophenone
球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis
1,4-二芐氧基(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 1,4-Dibenzoylbenzene
嗜熱側孢霉
2,2',4,4'-四羥基二甲(>95.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(T) 2,2',4,4'-Tetrahydroxybenzophenone
p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白小鼠50T 大豆35S/SS PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pGCsi/H1/Neo GFP-NON pGCsi/H1/Neo GFP-NON 低溫運輸,-20℃保存
1瓶 Ehrlich細胞株 Ehrlich 低溫運輸和保存
雞支原體培養(yǎng)基基礎 250g
2 ug pET-24c(+) pET-24c(+) 低溫運輸,-20℃保存
大鼠單胺氧化(MAO)免疫試劑盒進口、分裝
豚鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒進口、組裝
1瓶 FRhK-4細胞株 FRhK-4 低溫運輸和保存
1瓶 NCI-H209細胞株 NCI-H209 低溫運輸和保存
2 ug pCEP4 pCEP4 低溫運輸,-20℃保存
小鼠多萜長醇二寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移(DDOST/OST-48)免疫試劑盒進口、分裝