蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Ubiquitin Like Modifier Activating Enzyme 3 (UBA3)

UBE1C; NEDD8-Activating Enzyme E1 Catalytic Subunit; Ubiquitin-like modifier-activating enzyme 3; Ubiquitin-activating enzyme E1C

型號(hào)：GOY-01D2653

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：28.1kDa

實(shí)際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser241~Lys458 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

Recombinant NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1)產(chǎn)品名稱：醌NADH脫氫酶1(NQO1)重組蛋白物種：Mouse，小鼠DHQU; DIA4; DTD; NMOR1; NMORI; QR1; Azoreductase; DT-diaphorase; Menadione reductase; Phylloquinone reductase; Quinone reductase 1; NAD(P)H:quinone oxidoreductase 1

Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)產(chǎn)品名稱：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白物種：Dog，犬CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

Recombinant Vanin 3 (VNN3)產(chǎn)品名稱：血管非炎性蛋白3(VNN3)重組蛋白物種：Human，人Vascular non-inflammatory molecule 3

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

4-戊氧基二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 4-Pentyloxyphthalonitrile

 5-8F, 人高轉(zhuǎn)移鼻咽細(xì)胞系 Human

四氟鄰二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) Tetrafluorophthalonitrile

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

1,4,5,6-四氫-5,6-二氧-2,3-吡嗪二甲(>98.0%(HPLC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T) 1,4,5,6-Tetrahydro-5,6-dioxo-2,3-pyrazinedicarbonitrile

 異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

1,2-萘二甲(>98.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 1,2-Naphthalenedicarbonitrile

 BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

1-雜-15-冠-5-(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 1-Aza-15-crown 5-Ether

 NCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

1-雜-18-冠-6-(>98.0%(GC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 1-Aza-18-crown 6-Ether

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

1-雜-12-冠4-(>98.0%(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T) 1-Aza-12-crown 4-Ether

 熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

4'-乙酰并-15-冠-5-(>95.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 4'-Acetylbenzo-15-crown 5-Ether

泛素樣修飾激活酶3(UBA3)重組蛋白人25g 甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷 Methylα-D-Mannopyarnoside 室溫干燥保存

人抗磷脂?？贵w(IgM)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人ADP-核糖基化因子4(ARF4)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1g 魚藤酮 Rotenone 室溫避光保存

人細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3(SOCS-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50T 登革熱病毒Ⅰ、Ⅱ型PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

大鼠白介素22(IL-22)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

250ml Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)   常溫保存

無鹽胰胨水  20支