蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Amine Oxidase, Copper Containing 2 (AOC2)

RAO; DAO2; SSAO; Retina-specific copper amine oxidase; Semicarbazide-sensitive amine oxidase

型號：GOY-01D2595

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：31.7kDa

實際分子量：32kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Glu509~Phe756 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

腸堿性磷酸酶(ALPI)重組蛋白英文名稱：Recombinant Alkaline Phosphatase, Intestinal (ALPI)CIP; IAP; Calf Intestinal Alkaline Phosphatase物種：Rat，大鼠

肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)CKB; CKBB; CK-B; CK-1; Creatine Kinase, Brain物種：Dog，犬

N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)Alpha-N-Acetylgalactosaminidase; Alpha-galactosidase B物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis葡萄汁有孢漢遜酵母 Hanseniaspora uvarum

復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),5-15μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.), 5-15µm(length)

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum貝葉多孔菌

復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),1-2μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.), 1-2µm(length)

 爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠腸巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基

復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),1-2μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 1-2µm(length)

 Calu-1(人肺細(xì)胞)吳茱萸堿

復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),5-15μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 5-15µm(length)

 尿素八疊球菌 Sarcina ureae小紅酵母 Rhodotorula minuta

復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),5-15μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 5-15µm(length)

 DAB Kit/DAB顯色試劑盒涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis

復(fù)壁碳納米管 40-60nm(直徑),1-2μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 40-60nm(diam.), 1-2µm(length)

 戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusNEC(人食管細(xì)胞)

復(fù)壁碳納米管 60-100nm(直徑),5-15μm(長度) 質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method) Carbon Nanotube Multi-walled 60-100nm(diam.), 5-15µm(length)

 鏈輪枝菌 Streptoverticillium sp.植物桿菌 Lactobacillus plantarum

3,5-二芐氧基芐(>98.0%(GC)(T)) 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 3,5-Dibenzyloxybenzyl Bromide

含銅胺氧化酶2(AOC2)重組蛋白人100U Therminator II DNA 聚合 Therminator II DNA Polymerase -20℃保存

犬17羥孕酮(17-OHP)免疫試劑盒

大鼠B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

2 ug pDsRed1-N1 pDsRed1-N1 低溫運輸，-20℃保存

50T 新城疫病毒RT-PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

豚鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

猴子β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)免疫試劑盒

豬前列腺素F2α(PGF2α)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

牛5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)免疫試劑盒

1 管 M15大腸桿菌 M15 E.coli Strain -80℃保存

人CD19分子(CD19)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝