詳細(xì)介紹
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號(hào) |
羧酸酯酶2(CES2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2567 |
英文名稱:Recombinant Carboxylesterase 2 (CES2)
CE-2; CES2A1; PCE-2; iCE; Intestine,Liver; Methylumbelliferyl-acetate deacetylase 2; Cocaine esterase
型號(hào):GOY-01D2567
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:24.1kDa
實(shí)際分子量:24kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Leu452~Leu623 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點(diǎn):5.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase I (CA1)CA-I; CAI; Car1; CAB; Carbonic anhydrase B; Carbonate dehydratase I物種:Human,人
組蛋白脫乙?;?/span>10(HDAC10)重組蛋白英文名稱:Recombinant Histone Deacetylase 10 (HDAC10)酶與激酶物種:Rat,大鼠
B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激酶β(IkBKb)重組蛋白英文名稱:Recombinant Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb)IKK2; NFKBIKB; IKK-beta; IKKB; I-kappa-B kinase 2; Nuclear factor NF-kappa-B inhibitor kinase beta物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MDA-MB-468(人腺細(xì)胞)無(wú)色透鏈霉菌 Streptomyces hyalinum
前腎上腺髓質(zhì)素(1-20),人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Proadrenomedullin (1-20)(human)
東京根霉 Rhizopus tonkinensisEAC(小鼠艾氏腹水細(xì)胞)
前腎上腺髓質(zhì)素(45-92),人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Proadrenomedullin (45-92)(human)
青藤堿金色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces aureochromogenes
蛋白激酶C(19-36);蛋白激酶C選擇性抑制蛋白 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein
小麥紋枯病菌 Pellicularia gramineum泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.
蛋白激酶C(19-31) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Protein Kinase C (19-31)
奇異變形桿菌 Proteus mirabilisY1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)
蛋白激酶C(530-558) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Protein Kinase C (530-558)
IBRS-2(豬腎細(xì)胞)圓弧青霉 Penicillium cyclopium
甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3(104-173),人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human)
球菌屬 Lactococcus sp.美味側(cè)耳 Pleurotus sapidus
甲狀旁腺激素(13-34),人 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR pTH (13-34) (human)
苜蓿中華根瘤菌透質(zhì)酶(含100mL酶解緩沖液)
甲狀旁腺激素(3-34),牛 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR pTH (3-34) (bovine)
羧酸酯酶2(CES2)重組蛋白人500U 羧肽 A( 牛胰 ) Carboxypeptidase A 4℃保存
100uL 小麥Zein基因PCR引物 Common PCR Primer -20℃保存
人糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
5mg 羅丹明 123 Rhodamine 123 室溫干燥保存
50T 乳酸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
人生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)免疫試劑盒
葡萄糖(腦膜炎奈瑟氏菌專(zhuān)用) 20ml/支
1 mg MM4-64(FM®4-64) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1瓶 H97細(xì)胞株 H97 低溫運(yùn)輸和保存
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
2 ug pCW-Cas9 pCW-Cas9 低溫運(yùn)輸,-20℃保存