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          甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白大鼠

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-20 11:53:41瀏覽次數(shù):239

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號(hào) GOY-01D2548 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogena
          物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)    
          甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白大鼠公司正在出售的產(chǎn)品:內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶2抗體 英文名稱:ECE2 0.1ml嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗體 英文名稱:ECP 0.1mlα彈性蛋白抗體 英文名稱:alpha Elastin 0.1ml

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          肽基脯氨酰異構(gòu)酶E(PPIE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Peptidylprolyl Isomerase E (PPIE)PPI-E; CYP-33; PPIase E; Peptidyl Prolyl Cis/Trans Isomerase E; Cyclophilin E; Cyclophilin-33; Rotamase E物種:Human,人

          酪氨酰DNA磷酸二酯酶1(TDP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Tyrosyl DNA Phosphodiesterase 1 (TDP1)SCAN1; Tyr-DNA phosphodiesterase 1物種:Mouse,小鼠

          過(guò)氧化氫酶(CAT)活性蛋白英文名稱:Active Catalase (CAT)酶與激酶物種:Rat,大鼠

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號(hào)

          甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白大鼠

          Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          GOY-01D2548

           

           

          英文名稱:Recombinant Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH)

          G3PD; GAPD; Peptidyl-cysteine S-nitrosylase GAPDH

          型號(hào):GOY-01D2548

          酶與激酶

          代謝通路

          心腦血管

          肝膽病學(xué)

          營(yíng)養(yǎng)代謝

          物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          來(lái)源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

          預(yù)測(cè)分子量:25.5kDa

          實(shí)際分子量:26kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

          片段與標(biāo)簽:Gly56~Phe284 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 97%

          等電點(diǎn):8.8

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

          圖片3.png
          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

           

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

           

           

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          NCI-H292(人肺細(xì)胞)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

          大內(nèi)皮素-1 (1-39),豬 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Big Endothelin -1 (1-39),porcine

           釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

          腦鈉素-32,大鼠 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR BNP-32, rat

           小鼠腺腫瘤細(xì)胞小鼠皮膚肥大細(xì)胞培養(yǎng)基

          緩激肽 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Bradykinin

           假絲酵母 Candida sp.維涅蘭德固菌 Azotobacter vinelandii

          鈴蟾肽 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Bombesin

           大鼠前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基威爾酵母 Saccharomyces willianus

          緩激肽(1-5) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Bradykinin (1-5)

           異常漢遜酵母 Hansenula anomala香菇 Lentinula edodes

          緩激肽(1-6) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Bradykinin (1-6)

           中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuiiBC-019(人腺細(xì)胞)

          緩激肽(1-7) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Bradykinin (1-7)

           MA-891(小鼠腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

          頰肽 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR Buccalin

          甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)重組蛋白大鼠1 管 1A75枯草桿菌     1A75 Bacillus subtilis Strain -80℃保存

          小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          大鼠toll樣受體1(TLR1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

          豬脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

          2 ug pAdTrack pAdTrack 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          25g 葡聚糖凝膠 G-15 Sephadex G-15 室溫保存

          人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)免疫試劑盒

          100 mg Acridine Orange(AO) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

          人腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子1(TRAF1)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

          2 ug pKD20 pKD20 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

          兔子白血病抑制因子受體(LIFR)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

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