蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Branched Chain Aminotransferase 1, Cytosolic (BCAT1)

BCT1; ECA39; Branched-chain-amino-acid aminotransferase, cytosolic

型號(hào)：GOY-01D2470

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：28.9kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ala158~Pro386 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

谷光甘肽合成酶(GSS)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glutathione Synthetase (GSS)Glutathione synthase物種：Rat，大鼠

亞鹽氧化酶(SUOX)重組蛋白英文名稱：Recombinant Sulfite Oxidase (SUOX)酶與激酶物種：Cattle，牛

天冬氨酰tRNA合成酶2(DARS2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Aspartyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (DARS2)AspRS; Aspartyl-tRNA synthetase物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

One StepWestern Kit AP(Mouse)/一步法快速WB(AP)試劑盒(鼠)人肺腺細(xì)胞（胸膜滲出液）

三硫（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Anethole trithione

 植物桿菌 Lactobacillus plantarumHGC-27人胃細(xì)胞

香草（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 Vanillin 

 人牙周膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

?。?biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 VITAMIN D4

 光帽鱗傘 Pholiota nameko鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

香草 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Vanillin 

 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞)

葡鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 4-FLUOROCINNAMONITRILE

 異常漢遜酵母 Hansenula anomala嬰兒雙歧桿菌 Bifidobacterium infantis

鹽羥（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：檢查 Hydroxylammonium chloride

 大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小單孢菌 Micromonospora sp.

鹽雙環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：供TCL鑒別用 DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE

 CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株)骨肉瘤

解定（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 2-Pyridinealdoxime methochloride

支鏈轉(zhuǎn)氨酶1(BCAT1)重組蛋白小鼠人Stathmin 1(STMN1)免疫試劑盒

5g 剛果紅 Congo Red 室溫保存

100次 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 Animal Nuclear Protein Miniprep Kit 4℃保存

100µg 小鼠基因組DNA Mouse Genomic DNA 4℃保存

50L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液（干粉） Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存

牛草酰乙酸免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

250mL Sodium Citrate Buffer（檸檬酸鈉緩沖液），0.5M, pH5.5   Sodium Citrate Buffer，0.5M, pH5.5   常溫保存

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

10g 咪唑 Imidazole 室溫干燥保存

犬甲狀腺素(T4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

MS培養(yǎng)基（含瓊脂，不含蔗糖）  250g