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          周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人

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          • 周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2023-03-06 09:04:58瀏覽次數(shù):212

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號 GOY-01D312 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant?Cyclin?Dependent?Kinase?5?(CDK5)
          物種 Homo?sapiens?(Human,人)    
          周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:人H-ras/GTPase HRas ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人透明質(zhì)酸酶-1(Hyal-1/HAase)ELISA試劑盒96T 0.156-10 U/L人透明質(zhì)酸合成酶2(Hyaluronan synthase 2)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          英文名稱:Recombinant Carnosine Synthase 1 (CARNS1)  產(chǎn)品名稱:肌肽合酶1(CARNS1)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 4 (ADAMTS4)  產(chǎn)品名稱:血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶4(ADAMTS4)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Succinate Dehydrogenase Complex Subunit C (SDHC)  產(chǎn)品名稱:琥珀酸脫氫酶復(fù)合體C亞基(SDHC)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4 (UBR4)  產(chǎn)品名稱:泛素蛋白連接酶E3成分N-識別蛋白4(UBR4)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號

          周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人

          Homo sapiens (Human,人)

          GOY-01D312

          產(chǎn)品名稱:周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人

          英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5)

          PSSALRE; CDKN5; Cell division protein kinase 5; Serine/threonine-protein kinase PSSALRE; Tau protein kinase II catalytic subunit;TPKII catalytic subunit

          型號:GOY-01D312

          信號轉(zhuǎn)導(dǎo)

          酶與激酶

          神經(jīng)科學(xué)

          發(fā)育科學(xué)

          物種:Homo sapiens (Human,人)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

          亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞核, 細(xì)胞質(zhì)

          預(yù)測分子量:27.1kDa

          實(shí)際分子量:27kDa(差異分析請參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Asp92~Gln273 with N-terminal His Tag

          緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):6.3

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

          5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          緊密連接蛋白18抗體 Claudin 18

          緊密連接蛋白19抗體 Claudin 19

          緊密連接蛋白17抗體 Claudin 17

          緊密連接蛋白16抗體 Claudin 16

          CELF3蛋白抗體 CELF3

          鈣粘蛋白超家族CELSR1抗體 CELSR1

          牙骨質(zhì)蛋白1抗體 CEMP1

          CENPBD1蛋白抗體 CENPBD1

          著絲粒蛋白J抗體 CENPJ

          著絲粒蛋白L抗體 CENPL

          著絲粒蛋白I抗體 CENPI

          著絲粒蛋白M抗體 CENPM

          周期素依賴性激酶5(CDK5)重組蛋白人鬼傘屬 Bradyrhizobium vigna宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

          三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis龜裂鏈霉菌 Streptomyces rimosus

          COLO 201(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae暫無 Bacillus saccharoacetobutylicim

          香菇 Lentinula edodes人臍帶血單個(gè)核細(xì)胞

          L-GlutamineDami(人巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞)

          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti桿菌屬 Lactobacillus sp.

          不動桿菌 Acinetobacter sp.甘薯喙殼 Ceratocystis fimbriata

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