產品屬性：

英文名稱：Recombinant Cyclooxygenase-2 (COX 2)

PGG/HS; PGHS2; PHS2; HCox2; PTGS2; Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2; Prostaglandin G/H Synthase And Cyclooxygenase; Prostaglandin H2 synthase 2

型號：GOY-01D296

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

生殖科學

肺臟病學

胃腸病學

激素代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜

預測分子量：31.9kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Phe187~Asn425 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：7.4

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體 CHRNA9

煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體 CHRNA6

煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體 CHRND

凋亡加強結構域蛋白8抗體 CARD8

凋亡加強結構域蛋白7抗體 CARD7

β衣被蛋白抗體 beta COP

半胱胺酸4/11抗體 Caspase 4+Caspase 11

1號染色體開放閱讀框187抗體 C1orf187

C末端結合蛋白2抗體 CTBP2

21號染色體開放閱讀框13抗體 C21ORF13

9號染色體開放閱讀框61抗體 C9orf61

冠蛋白3抗體 Coronin 3

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小鼠成纖維細胞（EGFP標記）釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人食管細胞淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaePC-3M-IE8(人前列腺高轉移細胞株)

苜蓿中華根瘤菌

ZR-75-1(人腺細胞)BRL 3A, 大鼠肝正常細胞

百脈根根瘤菌 Rhizobium lotiMDA-MB-231（ATCC來源）, 人腺細胞

植物桿菌 Lactobacillus plantarum異常漢遜酵母 Hansenula anomala

Antibody-Biotin DiluentBiotin/標記抗體稀釋液(黃色)桔青霉

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus小鼠皮下結締組織細胞