產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D221 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
上海谷研實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-02 16:40:19瀏覽次數(shù):288
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
---|---|---|---|
貨號 | GOY-01D221 | 應用領域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9) |
物種 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽(Tag)或切除純化標簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | GOY-01D221 |
產(chǎn)品名稱:基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白小鼠
英文名稱:Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)
GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase
型號:GOY-01D221
酶與激酶
腫瘤免疫
感染免疫
心腦血管
肝膽病學
物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::分泌, 細胞外基質(zhì)
預測分子量:19.6kDa
實際分子量:20kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Ser225~Asp390 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:6.2
應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
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操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
磷酸化原癌基因c-Raf抗體 phospho-c-Raf(Ser338/Tyr340)
趨化因子受體1抗體 CX3CR1
磷酸化致癌基因C-Myc抗體 phospho C-Myc(Thr58/pSer62)
CD33抗體 CD33
磷酸化原癌基因c-kit抗體 phospho-c-kit(Tyr936)
磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Thr91+Thr93)
氯離子通道蛋白3抗體 CLCN3
磷酸化周期素E抗體 phospho-Cyclin E (Thr395)
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磷酸化Connexin 43蛋白抗體 Phospho-Connexin 43 (Ser368)
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絲切蛋白抗體 cofilin
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毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes尖頂羊肚菌 Morchella conica
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人皮膚成纖維樣細胞人卵巢細胞
HL-60, 人早幼粒白血病細胞人腦動脈血管平滑肌細胞培養(yǎng)基
豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum牛鏈球菌 Streptococcus bovis
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae金橫裂鏈霉菌 Streptomyces aureosegmentosus
費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
桿菌屬 Lactobacillus sp.燼灰鏈霉菌 Streptomyces cinereogriseus
U14(小鼠子宮頸細胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.FLAG標簽免疫親和介質(zhì)
低分化鼻咽細胞屬 Serratia sp.
異常漢遜酵母 Hansenula anomala磚紅鐮孢