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          更新時(shí)間:2023-03-02 16:26:11瀏覽次數(shù):107

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
          貨號(hào) GOY-01D212 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)
          物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)    
          內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:人皮卡丘素(Pikachurin)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人雌激素受體β(ERβ)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人內(nèi)皮素3(ET-3/END3)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL

          詳細(xì)介紹

          以下是相關(guān)產(chǎn)品:

          英文名稱:Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)  產(chǎn)品名稱:周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Calpain 1 (CAPN1)  產(chǎn)品名稱:鈣1(CAPN1)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

          英文名稱:Recombinant Caspase 1 (CASP1)  產(chǎn)品名稱:胱天1(CASP1)重組蛋白物種:Sus scrofa; Porcine (Pig,豬)

          英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VI (CA6)  產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶Ⅵ(CA6)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase VA (CA5A)  產(chǎn)品名稱:碳酸酐酶ⅤA(CA5A)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          英文名稱:Recombinant Janus Kinase 2 (JAK2)  產(chǎn)品名稱:Janus激酶2(JAK2)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          產(chǎn)品屬性:

          產(chǎn)品名稱

          物種

          貨號(hào)

          內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白小鼠

          Mus musculus (Mouse,小鼠)

          GOY-01D212

           

           

          產(chǎn)品名稱:內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白小鼠

          英文名稱:Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)

          酶與激酶

          型號(hào):GOY-01D212

          心腦血管

          物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

          來源:原核表達(dá)

          宿主E.coli

          內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

          亞細(xì)胞定位::Cell membrane; Single-pass type II membrane prote

          預(yù)測(cè)分子量:33.3kDa

          實(shí)際分子量:30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

          片段與標(biāo)簽:Ala326~Asn577 (Accession # Q4PZA2) with

          緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

          性狀:凍干粉

          純度:> 95%

          等電點(diǎn):6.2

          應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

          規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


          蛋白表達(dá)及純化:

          1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

          2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

          3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

          4.通過SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

          5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

          交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

          操作步驟:

          Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

          1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

          3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

          4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

          1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

          2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

          3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

          4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

           

          細(xì)胞數(shù)量

          Lysis Buffer加入量

          107個(gè)

          0.5 mL~1 mL

          5×106個(gè)

          0.2 mL~0.5 mL

           

           

          5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

          6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

          7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

          公司正在出售的產(chǎn)品:

          鈣粘附分子18抗體 CDH18

          9號(hào)染色體開放閱讀框86抗體 C9orf86

          CD276抗體 CD276

          21號(hào)染色體開放閱讀框25抗體 C21orf25

          22號(hào)染色體開放閱讀框36抗體 C22orf36

          補(bǔ)體組分1q子成分樣蛋白1抗體 C1QL1

          CD44抗體 CD44

          9號(hào)染色體開放閱讀框114抗體 C9orf114

          6號(hào)染色體開放閱讀框1抗體 C6orf1

          γ晶狀體蛋白S/γS-crystallin抗體 gamma crystallin S

          CD8β鏈(CD8-β)抗體 CD8B

          9號(hào)染色體開放閱讀框72抗體 C9orf72

          內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白小鼠NCI-H292(人肺細(xì)胞)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

          小麥紋枯病菌 Pellicularia gramineum泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.

          香菇 Lentinula edodes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          人小氣道平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基棕褐小單孢菌 Micromonospora brunnea

          Hep G2(人肝細(xì)胞)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

          大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞 Rattus

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

          BHK-21(倉鼠腎細(xì)胞)植物桿菌 Lactobacillus plantarum

          苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti泡盛曲霉 Aspergillus awamori

          臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

          草魚胚胎細(xì)胞細(xì)黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus

          A-498(人腎細(xì)胞)HL-60, 人早幼粒白血病細(xì)胞

          釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

           


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