蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)

LIPD; Lipase, Lipoprotein

型號：GOY-01D182

酶與激酶

代謝通路

心腦血管

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：32.6kDa

實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：His55~Glu316 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.5

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant N-Acetylneuraminic Acid Synthase (NANS)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰神經(jīng)氨酰酸合酶(NANS)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant NAD Kinase (NADK)  產(chǎn)品名稱：NAD激酶(NADK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Methylenetetrahydrofolate Reductase (MTHFR)  產(chǎn)品名稱：亞甲基四氫還原酶(MTHFR)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Methylpurine DNA Glycosylase (MPG)  產(chǎn)品名稱：N-甲基嘌呤DNA糖基化酶(MPG)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Ⅰ型補體受體抗體（C3b/C4b受體抗體） CD35

1號染色體開放閱讀框105抗體 C1orf105

趨化樣因子受體1抗體 CMKLR1

趨化樣因子受體1抗體 CMKLR1

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Ser33)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Ser37)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Thr41)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr333)

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr86)

βA3/A1-crystallin蛋白抗體 beta Crystallin A3

磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 phospho-beta Catenin (Tyr489)

γS-crystallin蛋白抗體 Beta crystallin S

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白人豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

BT-474(人腺導管細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

宇佐美曲霉 Aspergillus usamii中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

人顱蓋造骨細胞培養(yǎng)基SK-CO-1(人結直腸腺細胞)

刺孢吸水鏈霉菌昆變種 Streptomyces hygrospinocus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

葡萄牙假絲酵母 Candida lusitaniae蘇云金芽胞桿菌蠟螟亞種 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae

RL95-2(人子宮內膜細胞)STO(小鼠胚成纖維細胞)

粉擬青霉 Paecilomyces farinosus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

胎兒真皮成纖維細胞培養(yǎng)基香菇 Lentinula edodes

湯卜遜沙門氏菌 Salmonella thompson中國倉鼠肺成纖維樣細胞

人非小細胞肺腺細胞SCaBER(人膀胱鱗細胞)

蓋囊側耳 Pleurotus cystidiosus中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus人臍靜脈平滑肌細胞培養(yǎng)基