產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D131 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
上海谷研實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15026555973 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-02 15:01:26瀏覽次數(shù):280
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號 | GOY-01D131 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達90%以上。
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 貨號 |
丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D131 |
產(chǎn)品名稱:丙酮酸激酶同工酶R/L(PKLR)重組蛋白人
英文名稱:Recombinant Pyruvate kinase isozymes R/L (PKLR)
PK; PyK; PK1; PKL; Pyruvate Kinase Isozymes R/L; Glutamic--pyruvic transaminase 1; R-type/L-type pyruvate kinase; Red cell/liver pyruvate kinase
型號:GOY-01D131
酶與激酶
代謝通路
物種:Homo sapiens (Human,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:25.2kDa
實際分子量:28kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:Ile219~Met420 (Accession # P30613) with
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 95%
等電點:6.1
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
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操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
9號染色體開放閱讀框64抗體 C9orf64
9號染色體開放閱讀框62抗體 C9orf62
9號染色體開放閱讀框66抗體 C9orf66
9號染色體開放閱讀框68抗體 C9orf68
9號染色體開放閱讀框7抗體 C9orf7
9號染色體開放閱讀框71抗體 C9orf71
K-酪蛋白抗體 Casein Kappa
20號染色體開放閱讀框26抗體 C20orf26
二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白5抗體 CXXC5
L-型電壓依賴型鈣通道β抗體 CACNB2
C2CD4D蛋白抗體 C2CD4D
過氧化氫酶抗體 Catalase
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肝細(xì)胞HBV病毒株枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes異常漢遜酵母 Hansenula anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaBCIP/NBT KitBCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑盒
屎腸球菌 Enterococcus faeciumGC-1, 鼠原細(xì)胞
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
暗黑橄欖鏈霉菌 Streptomyces atroolivaceus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
小鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基百脈根根瘤菌 Rhizobium loti