中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品：人肥大細胞類1(CMA1)ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人T淋巴細胞活化抗原CD80(T-lymphocyte activation antigen CD80)ELISA試劑盒96T 78-5000 pg/mL人補體因子B(CFB)ELISA試劑盒96T 62.5-4000 ng/mL

產(chǎn)品屬性：

 

 

產(chǎn)品名稱：中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

型號：GOY-01D111

酶與激酶

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：53.3kDa

實際分子量：53kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile30~Gln247 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液，（pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%skl, 5% Trehalose and Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：8.7

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 5 (GSTa5)  產(chǎn)品名稱：S轉移酶α5(GSTa5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 2 (GSTa2)  產(chǎn)品名稱：S轉移酶α2(GSTa2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)  產(chǎn)品名稱：超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Calpain 1 (CAPN1)  產(chǎn)品名稱：鈣1(CAPN1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

 

 

 

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

B淋巴細胞激酶抗體 BLK

乳腺癌相關基因2抗體（鋅指蛋白364） BCA2

腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體 BAI2

促凋亡BNIP3L蛋白抗體 BNIP3L

Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 BAG3

BCL2樣10促凋亡蛋白抗體 BCL2L10

BCL2樣12含蛋白抗體 BCL2L12

BCL2分子伴侶調節(jié)蛋白5抗體 BAG5

Bcl2相互作用蛋白2抗體 BNIP2

乳腺癌擴增序列蛋白4抗體 BASC4

轉錄因子BTF3抗體 BTF3

磷酸化T淋巴細胞受體抗體 Phospho-Bcr (Tyr360)

中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白人膠紅酵母 Kocuria rosea異常漢遜酵母 Hansenula anomala

BT-549(人腺管細胞)厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

玉蜀黍赤霉 Gibberella zeaePC-3M(人前列腺細胞)

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis強壯根瘤菌 Rhizobium validum

黑木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum16HBE(人支氣管上皮樣細胞)

卡爾斯伯酵母 Saccharomyces carlsbergensisMiaPaCa-2, 人胰腺細胞

施氏假單胞菌 Pseudomonas stutzeri宛氏擬青霉

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠皮膚肥大細胞培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHGC-27(人胃細胞)

銅綠假單胞菌 Pseudomonas aeruginosa米根霉 Rhizopus oryzae

苜蓿中華根瘤菌NCI-H524(人非小細胞肺細胞)

大鼠胰腺上皮細胞培養(yǎng)基小鼠表皮角質形成細胞培養(yǎng)基