詳細(xì)介紹
公司上萬(wàn)種科研產(chǎn)品產(chǎn)品,主要供應(yīng)各大科研單位和學(xué)校,是國(guó)內(nèi)眾多科研單位的供應(yīng)商。公司嚴(yán)把質(zhì)量關(guān),確保每一個(gè)出廠產(chǎn)品質(zhì)量合格,讓您買的省心,用得放心。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
輔酶ⅠNAD(H)含量微量法測(cè)試盒 | 100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6321 |
商品介紹:
測(cè)定意義
輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(huán)(TCA)的主要?dú)涫荏w,生成的NADH經(jīng)呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時(shí),形成大量的ROS,同時(shí)NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質(zhì)三大代謝物質(zhì)分解中的氧化反應(yīng)絕大部分通過(guò)這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評(píng)價(jià)糖酵解和TCA循環(huán)的強(qiáng)弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說(shuō)明細(xì)胞呼吸耗氧量較高,處于過(guò)氧化狀態(tài)。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環(huán)。另外,NAD+降解產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、代謝和基因表達(dá)等具有重要的調(diào)控作用。
測(cè)定原理
分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過(guò)PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(lán)(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測(cè)吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進(jìn)一步采用MTT還原法檢測(cè)。
需自備的儀器和用品
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
測(cè)定操作表:
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時(shí)間,30min
b. 用96孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個(gè)酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個(gè)細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個(gè)酶活力單位。
補(bǔ)體成分8γ(C8γ)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 8g (C8g) 96T Homo sapiens (Human)
博來(lái)霉素水解酶(BLMH)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Bleomycin Hydrolase (BLMH) 96T Homo sapiens (Human)
前梯度蛋白2(AGR2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 96T Homo sapiens (Human)
絡(luò)絲蛋白(RL)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Reelin (RL) 96T Rattus norvegicus (Rat)
甲狀腺激素反應(yīng)基因(THRSP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Thyroid Hormone Responsive (THRSP) 96T Homo sapiens (Human)
蛋白C抑制因子(PCI)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 96T Homo sapiens (Human)
妊娠相關(guān)血漿蛋白A2(PAPPA2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Pappalysin 2 (PAPPA2) 96T Homo sapiens (Human)
補(bǔ)體成分1q子成分C(C1qC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) 96T Homo sapiens (Human)
泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長(zhǎng)分化因子11(GDF11)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 11 (GDF11) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子5(GDF5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 5 (GDF5) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子3(GDF3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Homo sapiens (Human)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
生長(zhǎng)分化因子1(GDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 96T Homo sapiens (Human)
ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1c) 人鋅指脂蛋白-1c(抗原) 0.5mg
IFN- Gamma(Interferon Gamma)Ag-mouse、rat 干擾素-γ多肽抗原(大、小鼠) 0.5mg
輔酶ⅠNAD(H)含量微量法測(cè)試盒IFN- Gamma(Interferon Gamma)Human 干擾素-γ多肽抗原(人) 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta)Anti-mouse,rat 干擾素-β抗原 0.5mg
IFN- Beta (Interferon Beta) human 干擾素-β抗原 0.5mg
PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原 0.5mg