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產(chǎn)品名稱(chēng):6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)紫外分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 紫外分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6355
分類(lèi):輔酶Ⅱ系列
商品介紹:
G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是磷酸戊糖途徑的關(guān)鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯,同時(shí)將NADP+還原為NADPH,供生物合成及維持細(xì)胞內(nèi)的還原狀態(tài)用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
測(cè)定原理:
G6PDH催化NADP+還原生成NADPH,在340 nm下測(cè)定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框3抗體 鋅指蛋白924抗體
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框127抗體 鋅指蛋白923抗體
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框129抗體 鋅指蛋白916B抗體
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框130抗體 鋅指蛋白913抗體
1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框131抗體 鋅指蛋白909抗體
大鼠精氨酸酶(Arg)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠精氨酸酶1(ARG1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠精氨酸酶1(ARG1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠精胺脲水解酶(AGMAT)elisa檢測(cè)試劑盒
6磷酸葡萄糖脫氫酶(G6PDH)紫外分光光度法測(cè)試盒柱式酵母質(zhì)粒 DNAout50 次 細(xì)菌 DNAout250 次
柱式 BAC DNAout 50 次 細(xì)胞松弛素 B 溶液 ,20mg/mL0.1mL
中提柱式 BAC DNAout5次 細(xì)胞核蛋白提取試劑盒50 次
柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout 50 次 細(xì)胞表面蛋白分離試劑盒8次
大提柱式 Ti 質(zhì)粒 DNAout5次 無(wú)脊椎動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix100 次
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。