詳細介紹
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱:乙醇微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6340
分類:輔酶Ⅰ系列
商品介紹:
酒是含酒精(乙醇)飲料的統(tǒng)稱,乙醇是酒的主要成分,是衡量酒質(zhì)量的重要指標之一。我國是早發(fā)明釀酒的國家,也是酒類產(chǎn)品消費大國,其消費量居世界。因此,快速、準確測定酒中乙醇含量,對于確保酒的質(zhì)量和保護消費者的健康具有重大意義。
測定原理:
乙醇在乙醇脫氫酶的催化下氧化脫氫生成乙醛,同時,NAD被還原生成NADH,NADH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,通過450 nm下測定吸光值變化可測得乙醇含量。
需自備的儀器和用品:
酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
腺苷酸環(huán)化酶6抗體 轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白1抗體
腺苷酸環(huán)化酶9抗體 轉(zhuǎn)化生長因子β1/TGF β1/TGF-β1抗體
三0酸腺檸檬酸裂解酶抗體 轉(zhuǎn)化生長因子β(TGFβ)抗體
蛋白激酶A2抗體 轉(zhuǎn)化神經(jīng)突起蛋白抗體
血管動蛋白抗體 轉(zhuǎn)化蛋白p21抗體(原癌基因H-ras抗體)
大鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠超敏熱休克蛋白70(HSP-70)elisa分析檢測試劑盒
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乙醇微量法測試盒柱式細菌 DNAout( 含 )50 次 新生霉素溶液 ,50mg/mL5mL
大提柱式細菌 DNAout4次 辛甲基硫吡喃葡萄糖苷 (OTG)5g
大提柱式細菌 DNAout( 含 )4次 辛甲基 β 葡糖苷1g
百萬堿基級細菌 (G-)DNAout10 次 心肌細胞生長因子5mL
百萬堿基級細菌 (G+)DNAout10 次 小鼠腫瘤細胞分離液 1.070200mL
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。