詳細介紹
產(chǎn)品名稱:氧化型谷胱甘肽(GSSG)微量法測試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測試方法: 微量法
貨號:GOY-01S6376
分類:谷胱甘肽系列
商品介紹:
GSH/GSSG是細胞內(nèi)最重要的氧化還原對之一。因此,測定細胞內(nèi)GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能夠很好地反映細胞所處的氧化還原狀態(tài),也是谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的主要指標之一。
測定原理
利用2-VP法測GSSG含量。
實驗中所需儀器及設(shè)備
可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器、1ml比色皿、雙蒸水
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測定步驟
1、 分光光度計預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提取:建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測定葉綠體中FBP酶活性。
建議測定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計算:
(1)按樣本蛋白濃度計算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
Fura-2 AM( 鈣離子熒光探針 )1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒30 次
Fura-2,五銨鹽1mg DNA PAGE 膠回收試劑盒100 次
Golgi-Tracker Red( 高爾基體紅色熒光探針 )1mg DNA 5’末端標記試劑盒10 次
Hydroxystilbamidine 10mg DMSO,PCR 級1.5mL
Indo-1 AM1mg dITP 溶液,2.5mM2mL
Dihydrorhodamine 123 10mg DNA 電泳分子量標準 (2)(50-400 bp)50 次
DiI( 細胞膜紅色熒光探針 )10mg DNA 電泳分子量標準 (2)(300-5000 bp)50 次
DiIC1(5) 碘化物100mg DNA 電泳分子量標準 (100-600 bp)50 次
DiIC12(3) 高氯酸化物100mg DNA 電泳分子量標準 (100-5000 bp)50 次
DiO( 細胞膜綠色熒光探針 )10mg DNA 電泳分子量標準 (100-200 bp)50 次
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa分析檢測試劑盒
大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)elisa檢測試劑盒
大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-TrCP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-TrCP)elisa檢測試劑盒
大鼠β-轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白(β-TrCP)elisa檢測試劑盒免費代測
氧化型谷胱甘肽(GSSG)微量法測試盒真菌種屬鑒定 PCR Mix 4100 次 大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout5次
真菌種屬鑒定 PCR Mix 5100 次 大提無內(nèi)毒素質(zhì)粒 DNAout10 次
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次 大鼠腫瘤細胞分離液 1.061200mL
真菌種屬鑒定 PCR Mix 7100 次 大鼠中性粒細胞分離液 1.091200mL
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次 大鼠胰島細胞分離液 1.063200mL
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