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          脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法測(cè)試盒

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          • 脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法測(cè)試盒

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2022-03-14 11:02:18瀏覽次數(shù):278

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          產(chǎn)品簡(jiǎn)介

          CAS 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
          分子量 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) 分子式 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
          貨號(hào) GOY-01S6398 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 產(chǎn)品僅用于科研    
          脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法測(cè)試盒公司各類熱銷產(chǎn)品FITC標(biāo)記的脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體
          FITC標(biāo)記的錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體
          FITC標(biāo)記的錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體
          FITC標(biāo)記的錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體
          FITC標(biāo)記的錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體

          詳細(xì)介紹

          產(chǎn)品名稱:脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)微量法測(cè)試盒
          規(guī)格100/96
          測(cè)試方法微量法
          貨號(hào):GOY-01S6398
          分類:維生素代謝系列
          商品介紹:
          DHAR
          存在于細(xì)胞質(zhì)、線粒體和葉綠體中。DHAR催化GSH還原DHA生成AsAGSSG,調(diào)控細(xì)胞AsA/DHA比值,是抗壞血酸-谷胱甘肽氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶。提高植物體內(nèi)的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,進(jìn)而提高植物食品的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

          測(cè)定原理:

          DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過(guò)測(cè)定DHA減少速率,計(jì)算DHAR活性。

          實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備:

          研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
          試劑的組成和配制
          提取液一:液體50mL×1瓶,4保存。
          提取液二:液體50mL×1瓶,4保存。
          試劑一:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑二:液體18μL×1瓶,4保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑三:粉劑×1瓶,-20保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4保存;
          試劑四:液體50mL×1瓶, 4保存;
          測(cè)定步驟
          1
          分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
          2
          、 將試劑一、二、三37(哺乳動(dòng)物)25(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
          3
          加樣表:

          圖1.jpg

          樣本的前處理
          FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
          胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)1510的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后48000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
          建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟提取粗酶液。
          FBP活性計(jì)算:
          1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
          單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
          FBP
          nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
          2)按樣本鮮重計(jì)算
          單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmolNADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
          FBP
          nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷ε×d×109]÷(W ×V÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
          V
          反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 LεNADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cmd:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mLT:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
          氨基糖苷類0酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體     轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體

          A激酶錨定蛋白5抗體     轉(zhuǎn)錄調(diào)控激活蛋白SNF5抗體

          芳香基硫酸酯酶F抗體     轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子MAZR抗體

          小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體     轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子HOXD9抗體

          腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體     轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子E2F7抗體
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