詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:植物花色苷可見分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 可見分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6456
分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。
測(cè)定原理:
采用pH示差法測(cè)定花色苷含量,當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有最大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色查爾酮形式,在530處無吸收峰, 利用此特性分別測(cè)定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響,排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。
T淋巴細(xì)胞CD1抗體 纖維連接蛋白抗體
透明質(zhì)酸介導(dǎo)細(xì)胞游走受體抗體 纖維蛋白原抗體
CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 纖維蛋白原單克隆抗體
腫瘤/抗原1B 纖維蛋白原γ鏈抗體
轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體 纖維蛋白原β鏈抗體
大鼠磷酸化胰島素受體(pISR1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠磷酸化乙酰A羧化酶(pACCase)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠磷酸肌醇3激酶(PI3K)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)elisa檢測(cè)試劑盒
植物花色苷可見分光光度法測(cè)試盒陶瓷研缽 ( 直徑 60 mm)1個(gè) 真菌 RNAout250 次
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)1個(gè) 真菌 DNAout50 次
真空抽濾盒1套 長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 上樣液1mL
第二章 “天凈沙"DNA純化產(chǎn)品 長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 配膠液200mL
非凍型血液 DNA 保存液100mL 長(zhǎng)效期 SDS-PAGE 還原劑10mL
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