詳細(xì)介紹
劑組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加1mL蒸餾水溶解;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測試方法 | 貨號 |
線粒體檸檬酸(MCA)微量法測試盒 | 100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6578 |
商品介紹:
CA是線粒體三羧酸循環(huán)的第一個中間產(chǎn)物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環(huán)強(qiáng)度的主要指標(biāo)之一。
配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進(jìn)行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環(huán)進(jìn)行狀況。
測定原理:
CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進(jìn)一步與苯肼反應(yīng),生成相應(yīng)的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。
測定操作表:
酶活性計(jì)算公式:
a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 18×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 18×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/104cell)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×細(xì)胞數(shù)量)÷T= 18×A460÷細(xì)胞數(shù)量
(4) 按液體體積計(jì)算
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫升血清每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/mL)= ×V反總÷V樣÷T= 18×A460
ε:氧化型鄰聯(lián)茴香胺毫摩爾消光系數(shù):7.5 L/mmol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;V樣:反應(yīng)中樣本體積,0.05mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,30min
b. 用96孔板測定的計(jì)算公式如下
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每毫克組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量為一個酶活力單位(U)。
DAO活性(nmol/min/mg prot)= ×V反總÷(V樣×Cpr)÷T= 36×A460÷Cpr
(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每克組織每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
DAO活性(nmol/min/g 鮮重)= ×V反總÷(V樣÷V樣總×W)÷T= 36×A460÷W
(3)按細(xì)胞數(shù)量計(jì)算:
酶活性定義:在pH7.2,溫度為37℃條件下,每104個細(xì)胞每分鐘催化產(chǎn)生1nmol H2O2所需的酶量定義為一個酶活力單位。
EFR3A蛋白抗體 膜二肽酶3抗體
ENAH蛋白抗體 膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體
乙基丙二酸腦病蛋白抗體 膜蛋白MLC1抗體
真核翻譯起始因子4E抗體 膜蛋白EVC2抗體
早期B淋巴細(xì)胞因子1抗體 膜蛋白CLDND2抗體
鯽魚卵黃蛋白原(VTG)elisa檢測試劑盒
家蠶卵黃蛋白(LT)elisa分析檢測試劑盒
家蠶卵黃蛋白(LT)elisa檢測試劑盒
甲基檸檬酸合酶(MCS)測試盒
甲硫氨酸(蛋氨酸)含量測試盒
線粒體檸檬酸(MCA)微量法測試盒多粘芽孢桿菌 產(chǎn)朊假絲酵母
魯氏接合酵母 銅綠假單孢菌
產(chǎn)氣腸桿菌凍干粉 枯草芽孢桿菌 中性蛋白酶(2000V/mL)
褐球固氮菌 運(yùn)動發(fā)酵單孢菌
韓國叢毛單胞菌 近平滑念珠菌ATCC22019凍干粉
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