詳細(xì)介紹
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產(chǎn)品名稱:海藻糖6磷酸合成酶(TPS)紫外分光光度法測(cè)試盒
規(guī)格 : 50管/48樣
測(cè)試方法: 紫外分光光度法
貨號(hào):GOY-01S6715
分類:海藻糖系列
商品介紹:
海藻糖是功能性低聚糖,具有非還原性、保濕性、熱酸穩(wěn)定性、抗凍結(jié)性等特性,是細(xì)胞在不良環(huán)境條件下產(chǎn)生的一種重要的抗逆應(yīng)激物之一,它對(duì)生物大分子和生物體組織有著非特異性的保護(hù)作用。海藻糖合成酶(Trehalose Synthase)催化麥芽糖合成海藻糖,是海藻糖生物合成的關(guān)鍵途徑之一。
測(cè)定原理:
TS催化麥芽糖產(chǎn)生海藻糖,使用糖化酶分解剩余麥芽糖為葡萄糖,通過(guò)葡萄糖氧化酶法測(cè)定葡萄糖含量,按照麥芽糖減少的量表示海藻糖合酶活性。
需自備的儀器和用品:
分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一:液體50mL×1瓶,4℃保存。
提取液二:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑二:液體18μL×1瓶,4℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用,用不完的試劑4℃保存;
試劑四:液體50mL×1瓶, 4℃保存;
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm,蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表:
樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g樣本,加入1mL提取液一),冰浴勻漿后于4℃,200g離心5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g離心10min,取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性,取沉淀加1mL提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎3s,間歇7s,總時(shí)間1min),然后4℃,8000g離心10min,取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP,則按照步驟②提取粗酶液。
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L抗體 溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族44成員1抗體
二肽基肽酶10抗體 溶質(zhì)載體蛋白家族35成員C2抗體
二肽氨基肽酶3抗體 溶質(zhì)載體蛋白家族21成員2抗體
DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體 溶質(zhì)載體蛋白家族20成員2抗體
B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體 溶質(zhì)攜帶物家族-1抗體
大象促卵泡素(FSH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大象促卵泡素(FSH)elisa檢測(cè)試劑盒
大象睪酮(T)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大象睪酮(T)elisa檢測(cè)試劑盒
大象黃體激素(LH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
海藻糖6磷酸合成酶(TPS)紫外分光光度法測(cè)試盒側(cè)孢短芽孢桿菌 藤黃微球菌
奇異變形桿菌ATCC35659凍干粉 中國(guó)臺(tái)灣根霉
粉褶側(cè)耳、粉紅側(cè)耳 惡臭醋酸桿菌混濁變種
單增李斯特菌 屎腸球菌(屎鏈球菌)
胰蛋白胨大豆瓊脂表面培養(yǎng)基60mm/25cm2 白色念珠菌ATCC90029凍干粉
FBP活性計(jì)算:
(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
(2)按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義:每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總:反應(yīng)體系總體積,1×10-3 L;ε:NADPH摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V樣:加入樣本體積,0.1 mL;V樣總:加入提取液體積,1mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g。